嗜热真菌Beta-1,3-葡聚糖酶结晶、晶体结构解析与催化残基鉴定

作     者：Anastassios C.Papageorgiou 陈进银 李多川 

作者单位：芬兰图尔库大学 山东农业大学 

会议名称：《中国菌物学会2015年学术年会》

会议日期：2015年

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 07[理学] 

基　　金：国家863计划(2012AA10180402) 国家支撑计划(2015BAD15B05)资助 

关 键 词：嗜热毛壳菌 Chaetomium thermophilum Beta-1,3-葡聚糖酶 结晶 晶体结构 

摘      要：真菌Beta-1,3-葡聚糖酶（分为内切酶和外切酶）具有重要的生物学功能,涉及真菌的众多生长发育过程。尽管目前仅有真菌的一个内切Beta-1,3-葡聚糖酶晶体结构被解析,但它的催化残基是推测性的,没有实验证明;另一方面,真菌外切Beta-1,3-葡聚糖酶的晶体结构是不清楚的。本研究以嗜热毛壳菌（Chaetomium thermophilum）的Beta-1,3-葡聚糖酶（Ct Glu N）为研究对象,将它的基因在毕赤酵母中获得高效表达,层析纯化蛋白并进行结晶,得到了它的晶体。X-衍射显示:酶蛋白以单分子不对称形式存在。定点突变实验表明:保守的Q167、Q218、E608、E631涉及酶的催化活性。产物鉴定显示:它是一种外切Beta-1,3-葡聚糖酶。目前酶的晶体结构正在解析中。酶晶体结构解析和定点突变为理解真菌Beta-1,3-葡聚糖酶的催化机制和热稳定性提供证据。