猪乙型脑炎病毒广西分离株FC792的囊膜糖蛋白E基因克隆及生物信息学分析
作者单位：广西兽医研究所 广西畜禽疫苗新技术重点实验室 广西大学动物科学技术学院 广西田林县动物疫病预防控制中心
会议名称：《动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧...》
会议日期：2013年
学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学]
基 金：广西自然科学基金项目(2011GXNSFB018032) 公益性行业(农业)科研专项(201103008) 广西科技攻关项目(桂科攻1123007-3) 广西畜禽疫苗新技术重点实验室系统性研究课题(12-071-28-A-5) 广西基本科研业务费专项(桂科专项13-1)等项目经费的共同资助
摘 要：为了研究开发快速、敏感、特异的猪乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)诊断试剂和免疫效果良好的猪JE基因工程疫苗,对2011年分离到的广西猪乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)FC792株的E基因进行克隆、测序及生物信息学分析。结果测序获得1500bp的完整FC792株E基因序列,经同源性比对及遗传进化树分析表明,FC792株为基因Ⅲ型JEV毒株,且属于弱毒株。应用在线软件SignalP4.1对FC792株E蛋白进行信号肽的预测,结果预测到FC792株E蛋白不存在信号肽。应用在线软件NetNGlyc1.0预测到FC792株E蛋白存在1个N-糖基化位点:154-NYSA,线软件NetPhos2.0预测到其存在如下磷酸化位点:丝氨酸(Ser)有10个位点;苏氨酸(Thr)有6个位点;酪氨酸(Tyr)有5个位点。应用在线免疫信息学软件预测到FC792株E蛋白有16个B细胞抗原优势表位(分值(score)≥0.85),5个CTL抗原表位,10个Th抗原表位。应用在线软件GOR4预测FC792株E蛋白的二级结构,发现α-螺旋区域占21.20%,延伸链区域占30.40%;无规则卷曲区域占48.40%。应用在线软件SWISS-MODEL对FC792株E蛋白进行三维结构预测的同源模建,结果可见FC792株E蛋白存在大量的无规则卷曲和延伸链区域,并有多个α-螺旋区域,它们螺旋扭转卷曲形成近似左右对称的2个亚基的二聚体空间立体结构。研究结果为今后研制猪JE诊断抗原和猪JE基因工程疫苗提供参考借鉴。