类风湿关节炎患者外周血单个核细胞NF-κB p65活性检测及盐酸青藤碱对其影响
作者单位：南方医科大学珠江医院风湿免疫科
会议名称：《全国第十届中西医结合风湿病学术会议》
会议日期：2012年
学科分类：100506[医学-中医内科学] 1006[医学-中西医结合] 1005[医学-中医学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学]
关 键 词：核因子-κB p65 类风湿关节炎 外周血单个核细胞 盐酸青藤碱
摘 要：类风湿关节炎(RA)是一种复杂的自身免疫病,目前认为RA由不明抗原介导的异常免疫反应参与,外周血淋巴细胞活化,关节滑膜炎症细胞浸润,产生大量炎症介质及自身抗体,以非化脓性增生性滑膜炎为主要病理特点,逐渐导致关节软骨的破坏,最后造成关节功能的障碍,并可伴有关节周围软组织及其它器官的损害。近年研究表明NF-κB(nuclear factot-kappa B)在RA中活化,参与了RA发病的多个环节,并起重要作用,抑制NF-κB活性为临床治疗各种RA提供了一条新的治疗性干预途径,同时也为筛选新型治疗RA的药物指明了前进方向。盐酸青藤碱(sinomenine,sin)是传统抗风湿药青风藤的提取物,临床治疗RA疗效确切,其抗风湿机理目前尚不十分明确。目的研究RA患者外周血单个核细NFB活性的改变情况,以及Sin对RA患者PBMC NF8活性的影响,进一步阐明RA发病机制及Sin治疗RA的药物作用机制。方法选择活动期RA患者,共10例,诊断均符合美国风湿病学院1987年RA的诊断标准。同时健康献血者10例为对照组,与RA组患者相比无性别及年龄构成差异。常规分离外周血单个核细胞(PBMC),RA病人及正常人PBMC各分为对照组:Sin组;PHA组;Sin+PHA组,在37℃,5%C02孵箱内培养6小时,收集培养细胞,提取核蛋白,ELISA法检测NF-κB转录因子,分光光度计450nm读取OD数值。结果与对照组比较RA患者PBMC NF-κB活性有显著增加(P0.001);正常人对照组PBMC与PHA刺激组NF-κB活性有显著差异性(P0.001);RA患者PBMC较PHA刺激组NF-κB活性有显著增加(P0.001);Sin处理后与正常人对照组比较PBMC NF-κB活性有显著减少(P0.001);正常人PHA组与PHA刺激加Sin处理组PBMC NF-κB活性比较,Sin对PHA刺激后的NF-κB活性有抑制作用(P0.001);PHA刺激加Sin处理组各浓度间比较PBMC的NF-κB活性依高低浓度递减,呈剂量依赖性(P0.001)。RA患者PBMC NF-κB活性经Sin共培养与对照组比较明显降低(P0.001);RA患者PHA组与PHA+Sin组PBMC NF-κB活性比较,Sin对PHA刺激后的NF-κB活性有抑制作用(P0.001)。PHA刺激加Sin共培养组各浓度组内比较有显著降低,呈剂量依赖性(P0.001)。结论 (1)正常人体内PBMC存在一定量的NF-κB活化,RA患者体内PBMC NF-κB处于高表达状态。(2)Sin对正常人及RA患者PHA刺激前后PBMC NF-κB活性均有影响,而且呈剂量依赖性。(3)Sin与对PBMC NF-κB p65蛋白亚基有抑制作用,部分抗风湿作用可能通过此途径实现。