鸦胆子油乳对HPV16亚型感染细胞的作用及机制研究
作者单位：温州医学院附属第一医院妇科 温州医学院附属第一医院医学科学研究所
会议名称：《2012年浙江省妇产科学及围产医学学术年会暨《妇产科常...》
会议日期：2012年
学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
摘 要：目的研究鸦胆子油乳在体外对HPV16亚型感染细胞的抑制作用及可能作用机制。方法选择人宫颈鳞状上皮永生化细胞系(Ect1/E6E7)与人宫颈癌CaSki细胞系作为HPV16亚型感染的宫颈癌前病变与宫颈癌体外实验模型。采用MTT法检测不同浓度鸦胆子油乳体外作用不同时间对HPV16感染细胞增殖活性的影响;Hoechst33258细胞核染色法观察细胞凋亡形态学变化;Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡率;半定量RT-PCR法检测HPV16E6、E7基因mRNA的表达;免疫细胞化学染色(Elivivison二步法)检测HPV16E6、E7、p53及RB基因蛋白的表达。结果 (1)5、10、20及40μg/ml鸦胆子油乳体外作用24、48及72h对HPV16感染细胞的增殖具有明显抑制作用,且表现为浓度与时间的依赖性(P0.05)。(2)HPV16阳性绌胞在鸦胆子油乳作用后发生了细胞凋亡形态学变化,5、10及20μg/ml鸦胆子油乳体外作用48h后细胞凋亡率逐渐升高(P0.05)。(3)5、10及20μg/ml鸦胆子油乳体外作用HPV16阳性细胞48h后E6与E7基因mRNA的相对表达量逐渐降低(P0.05)。(4)5、10及20μg/ml鸦胆子油乳作用后,HPV16E6、E7及突变型P53蛋白的表达逐渐减弱(P0.05),而Rb蛋白的表达逐渐增强(P0.05)。结论鸦胆子油乳在体外对HPV16亚型感染细胞具有抑制作用,其作用机制可能与药物下调病毒癌基因E6、E7表达相关。