Sunitinib逆转ABCG2介导肿瘤细胞多药耐药性的机制研究
作者单位：华南肿瘤学国家重点实验室
会议名称：《2009医学前沿论坛暨第十一届全国肿瘤药理与化疗学术会议》
会议日期：2009年
学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
关 键 词：Sunitinib 多药耐药 ABCG2/BCRP
摘 要：目的:探讨多靶点酪氨酸激酶抑制剂sunitinib逆转肿瘤细胞多药耐药作用及其机制。方法:MTT法检测sunitinib对乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP/ABCG2)高表达细胞S1-M1-80,多药耐药相关蛋白(multidrug resistance associatedprotein,MRP1/ABCC1)高表达细胞KB-CV60和C-A120,肺癌耐药蛋白(1ung resistanceprotein,LRP)高表达细胞SW1573/2R120,多药耐药蛋白(multidrug resistance,P-glycoprotein/ABCB1)高表达细胞MCF-7/adr及其相应的亲本细胞S1,KB-3-1,SW1573和MCF-7的增殖抑制效应及sunitinib体外逆转ABCG2,ABCC1,LRP和ABCB1介导多药耐药作用,流式细胞仪检测sunitinib对doxorubicin和Rho123在S1和S1-M1-80细胞中积累水平的影响,快速滤膜过滤法测定sunitinib对纯化ABCG2膜泡输送[H]-methotrexate的影响;Western blotting检测sunitinib对ABCG2蛋白表达的影响以及对Erk1/2和Akt磷酸化水平的影响;RT-PCR检测sunitinib对ABCG2 mRNA水平的影响。结果:2.5μM更低浓度sunitinib对所用实验细胞无明显细胞毒作用;Sunitinib能够特异性的逆转ABCG2介导的多药耐药,而对ABCC1,LRP和ABCB1介导的多药耐药无逆转作用。Topotecan和doxorubicin对S1-M1-80细胞的IC50值分别为5.132±2.024和6.845±1.035μM,sunitinib能够浓度依赖性的增加topotecan和doxorubicin对S1-M1-80细胞的细胞毒作用,在0.625,1.25和2.5μMsunitinib作用下,topotecan对S1-M1-80细胞的IC50值分别是1.411±0.042,0.472±0.136和0.091±0.012μM,分别逆转3.6,10.9和56.4倍;Doxorubicin对S1-M1-80细胞的IC50值分别是0.919±0.185,0.320±0.032和0.181±0.037μM,分别逆转7.4,21.4和37.8倍;Sunitinib不改变S1细胞对topotecan和doxorubicin的药物敏感性。Sunitinib浓度依赖性增加doxorubicin和Rho123在S1-M1-80细胞中的积累,在0.625,1.25和2.5μM时,阿霉素的积累分别是对照组的1.35,1.49和1.79倍,Rho123的积累分别是对照组的3.79,5.41和9.68倍,但sunitinib对doxorubicin和Rho123在亲本细胞S1中的积累无明显影响;2.5μMsunitinib能够显著抑制S1-M1-80细胞对Rho123的外排作用;Sunitinib可以显著抑制纯化的ABCG2膜泡对[H]-methotrexate的转运。Sunitinib不仅对BCRP蛋白和ABCG2的mRNA水平没有明显影响,而且对Akt和Erk1/2的磷酸化水平没有显著的阻断作用。结论:Sunitinib通过抑制ABCG2药物外排泵功能逆转ABCG2介导的多药耐药,对指导sunitinib临床联合ABCG2底物化疗具有一定意义。