表达绿色荧光蛋白的马立克氏病病毒CVI988/Rispens株重组病毒的构建
作者单位：南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室
会议名称：《中国畜牧兽医学会禽病学分会第十一次学术研讨会》
会议日期：2002年
学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学]
关 键 词：马立克氏病病毒 US2基因 绿色荧光蛋白 重组病毒
摘 要：提取马立克氏病病毒Ⅰ型疫苗毒株CV1988/Rispens的总DNA为模板,利用PCR技术扩增出病毒生长非必需的US2基因(约2.0kb).并克隆入T-easy载体获得载体pGUS2。将CMV启动子和增强子控制的含绿色荧光蛋白(GFP)基因的表达盒克隆入pGUS2载体US2基因中,成功构建了含GFP基因的转移质粒载体pGUS2GFP。用脂质体将其与CV1988株共转染鸡胚成纤维细胞(CEF)细胞.用96孔板稀释法得到纯化的表达绿色荧光蛋白的重组CV1988病毒株rCVIGFP。