泛素-蛋白酶体抑制剂MG132对大鼠神经源性膀胱纤维化TGF-β1/Smad信号通路的影响

作     者：陈娜娜 

作者单位：中国医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：李守林

授予年度：2023年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100202[医学-儿科学] 10[医学] 

主      题：神经源性膀胱 膀胱纤维化 MG132 TGF-β1 Smad7 SnoN 

摘      要：目的:探讨泛素-蛋白酶体抑制剂MG132对大鼠神经源性膀胱纤维化的治疗作用及其对膀胱纤维化TGF-β1/Smad信号通路的调控机制。方法:将30只SD雌性大鼠随机分为Sham组(n=10)、NB组(n=10)、MG132组(n=10)。Sham组大鼠暴露腰第5和第6脊神经根;神经源性膀胱(Neurogenic Bladder,NB)组和MG132组大鼠在暴露腰5和腰6脊神经根后横断两脊神经根之间的马尾神经。Sham组和NB组于造模后第1天起每天给予0.3ml二甲基亚砜(Dimeth Sulfoxide,DMSO)腹腔注射,MG132组采用MG132(溶于0.3 ml DMSO,0.1 mg/kg)替代NB组中的DMSO。28天后在清醒状态下进行尿动力测定,留取膀胱组织称量膀胱湿量,采用HE染色观察膀胱组织形态,Masson染色观察膀胱组织纤维化面积,免疫组织化学及Elisa检测TGF-β1、Smad3、Smad7、Sno N、Col-I、Col-III蛋白的表达情况。结果:1、大鼠膀胱湿重及组织形态学的变化:与Sham组比较,NB组大鼠膀胱湿重明显升高(P0.001),MG132组大鼠的膀胱湿重介于Sham组与NB组之间(均P0.001)。2、尿动力学指标:与Sham组相比,NB组大鼠的膀胱最大容量显著增大(P0.001),膀胱漏尿点压力明显下降(P0.001),顺应性明显升高(P0.001);MG132组大鼠的膀胱最大容量、膀胱漏尿点压力、膀胱顺应性介于Sham组与NB组之间,组间差异具有显著性(均P0.05)。3、膀胱纤维化水平的变化:与Sham组比较,NB组大鼠膀胱组织纤维化明显增加(P0.001),Col-I和Col-III相对表达量均明显升高(均P0.001);MG132组大鼠膀胱组织纤维化程度高于Sham组但低于NB组(均P0.001)。4、TGF-β1/Smad信号通路关键蛋白表达水平的变化:与Sham组比较,NB组中TGF-β1和Smad3蛋白表达上调(P0.001),Smad7蛋白表达减少(P0.001);MG132组TGF-β1、Smad3和Smad7蛋白的表达介于Sham组与NB组之间(均P0.001)。5、Sno N蛋白表达的变化:与Sham组比较,NB组中Sno N蛋白表达减少(P0.001);MG132组Sno N蛋白的表达介于Sham组与NB组之间(均P0.001)。结论:1、横断大鼠L5-6脊神经根之间马尾神经可成功构建神经源性膀胱大鼠模型。2、泛素-蛋白酶体抑制剂MG132可有效抑制大鼠神经源性膀胱纤维化加重,可能通过减少SnoN和Smad7的泛素化降解进而调控TGF-β1/Smad信号途径。