干燥综合征发病相关的关键基因及腺体中STAT1活化的临床研究

作     者：刘玲玉 

作者单位：厦门大学 

学位级别：硕士

导师姓名：石桂秀

授予年度：2022年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

主      题：干燥综合征 p-STAT1 IFN 唇腺活检 免疫组化 

摘      要：目的:目前干燥综合征(Sj(?)gren s syndrome,SjS)发病机制尚不清楚,本研究旨在分析SjS发病相关的关键基因,了解SjS发病机制中的关键致病通路,以及探索新的可用于诊断的指标。方法:使用整合生物信息学方法,例如稳健秩聚分析(Robust rank aggregation,RRA)、基因集富集分析(Gene set enrichment analysis,GSEA)等分析SjS患者的外周血、唾液腺组织和唾液上皮细胞的转录组数据,使用免疫组化染色法对SjS病例及对照组唇腺组织样本进行染色,分析IFN通路的活化标志,磷酸化的信号转导及转录激活蛋白1(Phosphorylated Signal Transducer and Activator of Transcription 1,p-STAT1)的异常表达。结果:整合生物信息学分析SjS患者外周血中上调基因的前10位是IFI44L、RSAD2、IFI44、IFI27、EPSTI1、IFIT1、IFIT3、IFI6、XAF1和MX1,它们的特征是与IFN应答相关。SjS患者唾液腺组织中上调基因的前10位是CXCL9、PTPRC、CXCL10、CXCL13、IFI44L、SAMHD1、CXCL11、XAF1、IFIT3 和CCL19,异常激活的通路主要包括IFN-α通路(富集分数(normalized enrichment score,NES)=1.95,错误发现率(False discovery rate,FDR)q0.001),IFN-γ 通路(NES=1.85,FDR q0.001),和炎症反应通路(NES=1.54,FDR q=0.0008),补体通路(NES=1.47,FDR q=0.005)异常激活。SjS患者腺上皮细胞中异常激活的通路主要包括IFN-α应答通路和参与免疫细胞迁移或趋化的通路(FDR q0.05)。免疫组化实验得出其IFN通路活化的标志p-STAT1在SjS患者唇腺组织中存在异常增多(P0.001),且该现象早于淋巴灶的形成。结论:通过整合生物信息学分析SjS的转录组特征,了解SjS发病的关键致病通路,其中IFN通路的活化标志p-STAT1是我们的重点关注对象。通过免疫组化实验得出:与对照组相比,SjS患者唇腺组织中存在p-STAT1异常改变,且无论是否形成淋巴灶,其p-STAT1的表达水平均高于对照组,该现象可作为诊断病人是否患有SjS的另一重要指标,尤其是淋巴灶阴性的病人。以及探讨丝氨酸727(Serine 727,Ser727)位点的STAT1磷酸化可能是SjS患者预防唾液腺破坏的潜在靶点。