肥胖T2DM前期红细胞功能障碍及葛根芩连汤干预作用

作     者：许清松 

作者单位：江西中医药大学 

学位级别：硕士

导师姓名：徐国良

授予年度：2023年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：葛根芩连汤 胰岛素抵抗 缺氧 红细胞 脂质组学 代谢组学 

摘      要：目的:探讨肥胖2型糖尿病（T2DM）前期胰岛素抵抗（IR）缺氧大鼠红细胞膜功能障碍及葛根芩连汤（GQD）干预作用。方法:1.建立肥胖T2DM前期IR缺氧大鼠模型给予SD大鼠60%脂肪供能的高脂饲料,正常组给予对照饲料,于第13周眼眶采血,制备血清检测空腹血糖（FPG）、空腹胰岛素（Fins）水平,并计算IR指数;采用ELISA试剂盒检测血清中的缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、缺氧诱导因子-2α（HIF-2α）及促红细胞生成素（EPO）含量;以大鼠IR指数及HIF-2α含量显著升高为标准,建立肥胖T2DM前期IR缺氧大鼠模型。***对肥胖T2DM前期IR缺氧大鼠的药效学研究模型建立成功后,大鼠随机分为模型组、罗格列酮组（阳性药组）及GQD低、中、高剂量组;正常组给予对照饲料,模型组及各给药组均以高脂饲料继续喂养;给药剂量:罗格列酮组（5 mg·g-1）,GQD低、中、高剂量组(生药浓度1.65、4.95、14.85g·kg),给药体积:10 mL·kg。给药16周,使用血气分析仪检测血气指标,并检测血清中FPG、Fins、HIF-1α、HIF-2α及EPO含量,计算IR指数,判断GQD的药效作用。3.肥胖T2DM前期IR缺氧大鼠及GQD干预后的红细胞膜脂质组学研究高脂饲料喂养第13周,将高脂组中IR指数、HIF-2α及EPO均显著升高的大鼠分为缺氧组,将仅有IR指数显著升高的大鼠分为非缺氧组。提取高脂饲料喂养16周及GQD给药16周各组大鼠的红细胞膜样品,应用脂质组学技术进行检测及采集数据,以VIP1、差异倍数（FC）≥1.3或≤0.77及P0.05）;高脂饲料喂养第16周,血气分析结果显示,两组的各项指标均没有显著变化。对缺氧组大鼠红细胞膜进行脂质组学分析,发现有57个代谢物含量发生显著变化,主要为磷脂类、甘油酯类及胆固醇酯类等物质;对鉴定到的代谢物进行分类统计分析,发现缺氧组大鼠及非缺氧大鼠红细胞膜总磷脂、总饱和磷脂及总胆固醇酯类物质含量显著升高（P0.05）,总饱和磷脂、总胆固醇酯含量显著升高（P0.01）,总不饱和磷脂含量显著下降（P0.01）;其中GQD可以显著回调其中的15个代谢物,统计分析发现,模型组总磷脂、总饱和磷脂含量显著上升（P0.01）,总不饱和磷脂含量显著降低（P0.01）,GQD低剂量组可以明显回调总磷脂、总饱和磷脂,总不饱和磷脂含量（P0.05,P0.01）,GQD中、高剂量组总不饱和磷脂含量显著升高（P0.05,P0.01）。GQD可能通过改变磷脂类、鞘脂类及甘油酯类等