空肠弯曲菌诱导鸡防御肽的表达及芽孢杆菌对其定植的影响研究

作     者：李鹏祥 

作者单位：青海大学 

学位级别：硕士

导师姓名：丁保安;徐福洲

授予年度：2023年

学科分类：0905[农学-畜牧学] 09[农学] 

主      题：空肠弯曲菌 芽孢杆菌 宿主防御肽 肠道菌群 生长性能 

摘      要：空肠弯曲菌被认为是全球食源性细菌性肠胃炎的主要病因。鸡是空肠弯曲菌的主要宿主。禽类对空肠弯曲菌的先天免疫反应仍不明确。宿主防御肽(HDPs)是禽类先天免疫系统的主要成分。空肠弯曲菌感染诱导鸡中HDPs的表达,然而,对禽HDPs与空肠弯曲菌定植的相互作用研究较少。本研究通过qRT-PCR探究体内外空肠弯曲菌诱导宿主防御肽的动态表达。在鸡巨噬细胞HD11中,AvBD1-2、CATH1-3、AvBD7、AvBD4和AvBD6等HDPs在未处理的细胞中表达量相对较高,而空肠弯曲菌感染后表达量受到抑制。然而,空肠弯曲菌感染造成HD11细胞中低表达水平的AvBD3、AvBD5、AvBD8-14和CATHB1等HDPs的表达量显著增加。在鸡感染实验中,分别于感染后1、3、15天取空肠弯曲菌感染组与空白组鸡脾脏和盲肠扁桃体。空肠弯曲菌感染鸡的脾脏中,只有AvBD14的表达量在感染1天时升高,大多数HPDs在感染3天时显著上调,在感染15天时明显降低至未感染对照组水平;在鸡盲肠扁桃体中,只有AvBD9和AvBD14在感染1天时表达量显著上调。综上所述,空肠弯曲菌的感染诱导了鸡巨噬细胞和免疫组织中禽HPDs的动态表达。抑制禽类HPDs的表达,可能是空肠弯曲菌逃避鸡免疫系统在鸡肠道中持续定植的一种策略。家禽弯曲菌防控一直是食源性污染的难题,目前家禽生产中尚未报道有切实可行的防控措施。本研究选用两株芽孢杆菌,在体外通过牛津杯法测定芽孢杆菌对弯曲菌的抑菌效果;在体内通过灌喂芽孢杆菌来研究其对空肠弯曲菌在鸡体内定植的影响。结果显示:在体外培养条件下,两株芽孢杆菌均表现出广谱抗菌活性,对不同宿主源弯曲菌的生长具有显著抑制效果。体内试验显示,灌喂芽孢杆菌组鸡生长性能、免疫器官发育均优于对照组,同时对弯曲菌的定植具有显著抑制作用。肠道微生物菌群测定结果显示,两株芽孢杆菌对回肠微生物菌群无显著影响,弯曲菌感染后,盲肠内容物菌群门水平上变形菌门丰度升高,而灌喂两株芽孢杆菌降低变形菌门的丰度,在属水平上Bacillus CAU21可以降低弯曲菌属的菌群丰度。研究结果显示本试验使用的芽孢杆菌对空肠弯曲菌在鸡肠道内定植具有显著抑制效果,具有发展成为家禽弯曲菌感染防控产品的潜力。