肠道菌群与非瓣膜性房颤患者抗凝后出血的相关性研究

作     者：李昌霞 

作者单位：赣南医学院 

学位级别：硕士

导师姓名：谢东明

授予年度：2023年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

主      题：非瓣膜性心房颤动 肠道菌群 口服抗凝药物 出血 

摘      要：目的:本实验拟通过16S r RNA分析非瓣膜性房颤患者抗凝后出血肠道菌群的改变及临床表型的差异,旨在为临床医生指导非瓣膜性房颤患者使用抗凝药物过程中减少或预测出血事件的发生提供一个更有价值的生物标志物。方法:选取2021年3月1日至2022年11月1日在赣南医学院第一附属医院心血管内科患者中符合纳入与排除标准的非瓣膜性心房颤动患者为研究对象,分为出血组(Bleeding AF group,N=27)和为房颤组(AF group,N=47)。收集患者临床资料、药物使用情况及粪便标本。粪便标本采用16S r RNA高通量测序,利用QIIME2进行微生物组生物信息学分析,使用Mann-Whitney U test或者Kruskal-Wallis test行物种差异检验。采用线性判别分析效应量(LEf Se)对生物标志物进行定量分析,使用PICRUSt2执行功能分析。结果:1.临床资料比较:(1)AF group与Bleeding AF group的HAS-BLED出血风险评分和总胆固醇存在统计学差异(P0.05)。(4)10mg-group、15mg-group与20mg-group不同剂量利伐沙班对房颤抗凝后出血的影响存在统计学差异(P0.017),10mg-group与15mg-group、20mg-group存在着统计学差异(P0.017)。2.肠道菌群比较:(1)运用16S r RNA对AF group及Bleeding AF group进行肠道菌群差异性分析,Bleeding AF group肠道菌群丰度较AF group下降,肠道菌群组成结构存在差异(P0.05)。(2)属水平差异菌群分析提示AF group以乳酸杆菌(Ligilactobacillus)为优势差异菌群,较Bleeding AF group丰度明显增多;Bleeding AF group以经粘液真杆菌属(Blautia)为优势差异菌群,较AF group丰度明显增多。(3)LEf Se(LDAEffect Size)差异菌群分析提示Bleeding AF group中发挥主要作用的微生物群是经粘液真杆菌属(blautia)、放线菌属(actinomyces)、梭菌属(tyzzerella)、隐杆菌属(atopobium)。AF group中发挥主要作用的微生物群是分节丝状菌属(Candidatus＿Arthromitus),螺杆菌属(Helicobacter),发酵粘液乳杆菌属(Limosilactobacillus),唾液联合乳杆菌属(Ligilactobacillus)。(4)相关性分析:采用单环境因子差异显著性(envfit test)对临床指标TC及HAS-BLED评分对群落影响的显著性进行分析,结果提示TC(r=0.21,P值0.01),HAS-BLED评分(r=0.15,P值0.01),TC及HAS-BLED评分对群落具有一定显著影响;采用蒙特卡罗置换检验(Permutation Test)评估TC及HAS-BLED评分对群落影响的相关性,结果提示F=2.147,P值0.05,TC及HAS-BLED评分与群落影响有一定的相关性。其中TC与放线菌属(Actinomyces)、幽门螺杆菌属(Helicobacter)成正相关,HAS-BLED评分与放线菌属(Actinomyces)、幽门螺杆菌属(Helicobacter)、毛螺菌属(Lachnospiraceae＿NK4A136＿group)成正相关。(5)功能分析:AF group和Bleeding AF group在KEGG level2层级注释结果,共在2个通路富集,AF group和Bleeding AF group在KEGG level3层级注释结果,共有14条代谢通路富集。结论:我们首次为肠道菌群与房颤患者抗凝后出血的关系及对临床指标的影响提供了潜在证据。肠道菌群的丰度及组成结构的差异可能影响房颤患者抗凝后出血事件发生。选择外源性补充益生菌如普拉梭菌、双歧杆菌属、嗜黏蛋白艾克曼菌可能可以减少抗凝后出血的风险。通过适度减少抗凝房颤患者的总胆固醇水平,纠正出血评分中一些可逆的因素如降低患者血压、改善患者肝肾功