石河子地区集约化牛场奶牛乳房炎大肠杆菌分离鉴定及生物学特性初步研究

作     者：胡亚辉 

作者单位：塔里木大学 

学位级别：硕士

导师姓名：李莲瑞;黄新

授予年度：2022年

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

主      题：奶牛乳房炎 大肠杆菌 MIC 毒力基因 耐药性 

摘      要：奶牛乳房炎是集约化牛场奶牛的主要疾病之一,该病对全国各地的奶牛场均造成了巨大的经济损失,但石河子地区乳房炎相关报道较少,因此拟调查新疆石河子地区集约化牛场奶牛乳房炎感染情况,以期为石河子地区细菌性奶牛乳房炎的诊断与防治工作提供基础数据。本研究在2022年3月～2022年7月采集新疆石河子地区11个集约化牛场共计106份临床型乳房炎奶牛的乳样,通过对临床型乳房炎样品进行分离鉴定、生化鉴定、分子检测等试验,最终得到25株大肠杆菌。25株大肠杆菌采用PCR方法进行系统发育分群、毒力基因检测。结果显示:25株大肠杆菌分别属于4个系统发育群,其中28%属于A群、52%属于B1群、8%属于C群;12%属于E群;25株大肠杆菌毒力基因检测结果显示,黏附素、溶血素、铁摄取系统及其他四类16种毒力基因中检测到黏附素类和其他类的10种毒力基因,分别是csg A、fim H、fim A、flu、luxs、esp A、pap、pta、mota,其中csg A、fim H、luxs、pta和mota毒力基因检出率为100%,经统计发现25株大肠杆菌最少携带5种毒力基因。25株大肠杆菌全基因组测序结果使用Serotype Finder 2.0和七对ST型管家基因进行血清型分型和多位点分型。结果显示25株大肠杆菌中76%(19/25)被鉴定为O血清型,其余6株未分型。19株大肠杆菌分别属于11个不同的血清型,其中最常见的是O101血清型(5株)、O89血清型(4株);多位点分型结果显示25株大肠杆菌中仅有14株具有多位点序列类型,属于11种ST型,分别为:ST4151、ST2169、ST10、ST711、ST154、ST1508、ST398、ST906、ST56、ST361、ST354型,说明25株大肠杆菌ST型表现多样性,其中仅ST10占比为21.4%(3/14)略多于其他ST型。25株大肠杆菌使用MIC试验方法进行药敏分析,结果显示,大肠杆菌分离株对链霉素、庆大霉素、磺胺甲恶唑、四环素、头孢噻呋钠、泰乐菌素、阿奇霉素7种抗生素药物均表现为耐药,仅对多黏菌素表现敏感,并且统计结果显示其存在多重耐药情况,6种及以上抗生素药物的菌株占比为92%(23/25)。从大肠杆菌的五类16种耐药基因中检测到13种耐药基因,分别为oqxab、gyra、aac(6’)-Ib、sul、sul、sul、bla 、bla 、aad A、aac C、aph(3’)-Ia、tet A、tet B,其中25株大肠杆菌均检测到gyra和bla 两种耐药基因。