菲律宾丝沉香中2-（2-苯乙基）色酮类化合物及其生物活性研究

作     者：杨红润 

作者单位：大理大学 

学位级别：硕士

导师姓名：戴好富;王佩

授予年度：2023年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：丝沉香 菲律宾 2-(2-苯乙基)色酮 抗炎活性 细胞毒活性 

摘      要：沉香是瑞香科（Thymelaeaceae）沉香属（Aquilaria Lam.）或拟沉香属（Gyrinops Gaertn.）植物抵御外界伤害缓慢形成的含有树脂的木材,是一种名贵药材和天然香料。2-（2-苯乙基）色酮是沉香中主要的活性成分,也是沉香真伪鉴定和品质评价的关键成分。菲律宾是野生沉香树种分布最多的国家,其中丝沉香(Aquilaria filaria（Oken）Merr.)是菲律宾产沉香的主要基原树种之一。近年来,菲律宾丝沉香在国际市场中备受青睐,然而,未见菲律宾丝沉香的化学成分报道,对其鉴定与应用缺乏科学指导。目的:研究菲律宾丝沉香中2-（2-苯乙基）色酮类化合物,通过对其结构特征及生物活性研究,为菲律宾丝沉香的化学鉴定及应用提供科学依据。方法:菲律宾丝沉香经95%乙醇回流提取,采用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取得到各部分萃取物。在超高效液相色谱质谱联用（UHPLC-MS）技术引导下,利用硅胶、反相（RP-18）、葡聚糖凝胶（Sephadex LH-20）柱色谱及高效液相色谱（HPLC）等多种色谱分离技术分离纯化乙酸乙酯萃取物中2-（2-苯乙基）色酮类化合物。通过核磁共振波谱（NMR）、高分辨质谱（HR-ESI-MS）、紫外光谱（UV）等数据解析化合物的结构;利用X射线单晶衍射和ECD量子化学计算等方法确定化合物的绝对构型。采用脂多糖（LPS）诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7炎症反应模型,通过Griess法检测2-（2-苯乙基）色酮类化合物对NO的生成抑制作用;同时采用MTT法测试2-（2-苯乙基）色酮类化合物对5种癌症细胞株的细胞毒活性。结果:从菲律宾丝沉香乙酸乙酯萃取物中共分离鉴定了41个2-（2-苯乙基）色酮类化合物（1～41）,其中19个为新化合物（1～17,23和32）,其结构分别鉴定为:菲律宾丝沉香酮A（1）、菲律宾丝沉香酮B（2）、菲律宾丝沉香酮C（3）、菲律宾丝沉香酮D（4）、4 -甲氧基菲律宾丝沉香酮D（5）、菲律宾丝沉香酮E（6）、4 ,4 -二甲氧基菲律宾丝沉香酮E（7）、菲律宾丝沉香酮F（8）、菲律宾丝沉香酮G（9）、4 -甲氧基菲律宾丝沉香酮G（10）、4 ,4 -二甲氧基菲律宾丝沉香酮G（11）、菲律宾丝沉香酮H（12）、6 -羟基柯拉斯那素B（13）、4 -甲氧基丝沉香酮P（14）、菲律宾丝沉香酮I（15）、菲律宾丝沉香酮J（16）、菲律宾丝沉香酮K（17）、菲律宾丝沉香酮L（23）和菲律宾丝沉香酮M（32）。上述化合物包括22个2-（2-苯乙基）色酮二聚体（1～22）,9个5,6,7,8-四氢-2-（2-苯乙基）色酮（23～31）和10个flindersia型2-（2-苯乙基）色酮（32～41）。生物活性测试结果表明化合物1～7、10、12、13、16和17具有一定的抗炎活性,其IC值为33.94～57.93μM;化合物7、12和13对5种癌症细胞株有一定的细胞毒活性,其IC值为9.80～48.81μM。结论:本研究从菲律宾丝沉香中分离得到多种类型的2-（2-苯乙基）色酮类化合物。首次从菲律宾丝沉香中发现了由5,6,7,8-四氢-2-（2-苯乙基）色酮单元（THPEC）和flindersia型2-（2-苯乙基）色酮单元（FTPEC）通过C5-O-C7 连接形成的2-（2-苯乙基）色酮二聚体,以及由5,6,7,8-四氢-2-（2-苯乙基）色酮单元（THPEC）和6,7-二羟基化的flindersia型-2-（2-苯乙基）色酮单元（FTPEC）通过单醚键连接形成的2-（2-苯乙基）色酮二聚体。菲律宾丝沉香中2-（2-苯乙基）色酮二聚体的连接位置及取代方式在已发现的二聚体中较为少见,具有一定的特征性。生物活性测试发现2个2-（2-苯乙基）色酮二聚体具有较好的抗炎和抗癌细胞毒活性,可为抗炎和抗癌药物的研发提供理论依据。