红景天苷对重症急性胰腺炎大鼠保护作用的机制研究

作     者：肖丹阳 

作者单位：兰州大学 

学位级别：硕士

导师姓名：李培武

授予年度：2021年

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

主      题：红景天苷 重症急性胰腺炎 NLRP3炎症小体 天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-1 白介素-1β 实验药理 

摘      要：目的：探讨红景天苷对重症急性胰腺炎大鼠的保护作用以及其可能的作用机制。 方法：将30只健康雄性Wistar大鼠分为假手术组（Sham组）、模型组（SAP组）和红景天苷治疗组（Sal组），每组10只。用3.5%水合氯醛诱导麻醉后，假手术组大鼠开腹经胰管缓慢逆行注射生理盐水，模型组大鼠经胰管缓慢逆行注射5%牛黄胆酸钠建立SAP大鼠模型，治疗组大鼠在重症急性胰腺炎模型基础上腹腔注射红景天苷溶液（60mg/kg）。各组大鼠经相应处理后，于术后24小时处死，采集血液，离心后收集血清，并用ELISA法检测大鼠血清淀粉酶、IL-1β、IL-6以及TNF-α水平;采集各组大鼠胰腺组织，一部分用于HE染色及免疫组织化学法检测，于光学显微镜下观察胰腺组织病理学变化及胰腺组织NLRP3、Caspase-1蛋白阳性表达。另一部分用于蛋白印迹法检测大鼠胰腺组织中NLRP3、pro-Caspase-1、Caspase-1p10、Caspase-1p12的蛋白相对表达水平。 结果：①SAP组、Sal组大鼠血清AMY水平较Sham组显著升高，差异有统计学意义（P0.05）;Sal组大鼠血清AMY水平较SAP组明显降低（P0.05）;②SAP组、Sal组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平均较Sham组明显升高，差异均具有统计学意义（P0.05）;Sal组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平均较SAP组显著降低（P0.05）。③蛋白印迹法测SAP组、Sal组大鼠胰腺组织NLRP3、pro-Caspase-1、Caspase-1 p10、Caspase-1p12蛋白表达均较Sham组明显增加，差异均具有统计学意义（P0.05）;治疗性给药后，Sal组大鼠胰腺组织NLRP3、pro-Caspase-1、Caspase-1 p10、Caspase-1p12蛋白表达均较SAP组显著降低（P0.05）。④胰腺组织病理形态学改变：与Sham组相比较，SAP组、Sal组大鼠胰腺组织损伤均明显加重，以SAP组为著;治疗性给药后，Sal组大鼠胰腺组织损伤程度较SAP组明显减轻。具体表现为：Sham组大鼠胰腺组织细胞形态基本正常，组织结构清晰;SAP组大鼠胰腺组织间质水肿，实质结构破坏，大量炎症细胞浸润，局部组织坏死;治疗性给药后，Sal组大鼠胰腺组织实质结构较清晰，间质水肿程度及炎症细胞浸润程度与SAP组相比均显著减轻。⑤胰腺组织免疫组织化学法检测结果：与Sham组相比，SAP组、Sal组大鼠胰腺组织中NLRP3和Caspase-1蛋白阳性表达明显增多（P0.05）;与SAP组相比较，Sal组大鼠胰腺组织中NLRP3和Caspase-1蛋白阳性表达显著减少（P0.05）。 结论：重症急性胰腺炎的发生可导致大量炎症因子释放及胰腺组织损伤，红景天苷可降低SAP大鼠血清AMY及炎症因子水平，减轻胰腺组织损伤，这种保护作用可能通过抑制NLRP3炎症小体通路，减少IL-1β等促炎因子的释放来实现。