CASR/VDR/PTH1R信号通路在含钙肾结石发生机制中的初步研究

作     者：李静玲 

作者单位：昆明医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：李颢

授予年度：2022年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

主      题：钙敏受体 维生素D受体 重组人甲状旁腺激素1受体 基因表达 肾结石 

摘      要：[目 的]初步探索性研究CASR/VDR/PTH1R信号通路在人体含钙肾结石发生中的作用及机制。[方 法]选取2020-9月至2021-10月在昆明医科大学第一附属医院10例单侧肾癌在手术时获得了新鲜的正常肾髓质10mg为对照组,12例结石导致积水肾行单侧肾切除术时获得新鲜肾髓质10mg为实验组。取肾结石患者肾脏髓质为实验组,肾脏肿瘤患者正常肾髓质为对照组,分别采用q-PCR、WB、免疫荧光法检测肾实体组织中CASR、VDR、PTH1R的mRNA表达和蛋白水平。[结 果]RT-PCR 的研究结果示:CASR、PTH1R、P38-MAPK、ATF2、FGF23、JNK基因mRNA在积水肾髓质及肾肿瘤正常髓质表达水平的差异无明显统计学意义（P0.05）。VDR的mRNA在积水肾髓质及肾肿瘤正常髓质表达水平的差异具有统计学意义（P0.05）。免疫印迹WB的结果示:实验组肾结石患者的CASR、VDR、JNK蛋白的表达较对照组肾肿瘤患者上调,PTH1R、ATF2蛋白表达下调,而P38-MAPK、Erk1/2蛋白在积水肾及肿瘤正常肾髓质中无明显差异性表达。免疫荧光的结果示:***在肾组织主要表达于肾小管上皮细胞胞质中。在实验组及对照组患者的肾组织中均有表达,且在实验组中高表达,在对照组中低表达。VDR主要表达在肾小管上皮细胞中、足细胞及肾近端小管中,在实验组及对照组患者肾组织中均有表达,且在实验组中高表达。***主要表达在肾小管上皮细胞中、足细胞及肾近端小管中,在实验组及对照组患者肾组织中均有表达,且在实验组中高表达,对照组中低表达。***1R主要表达在肿瘤患者的远端小管,积水肾患者的近端小管,且在实验组中低表达,在对照组中高表达。4.P38-MAPK主要表达在肾小管上皮细胞中,在实验组及对照组中均出现高表达***1/2主要表达在肾小管上皮细胞中,且在实验组中低表达,在对照组中高表达。[结 论]CASR基因在结石患者的肾髓质中表达上调,且主要表达定位在肾小管上皮细胞的胞质中。VDR基因在结石患者的肾髓质中表达上调,且主要表达定位在肾近端小管。PTH1R基因在肾结石患者的肾髓质中表达下调,其中PTH1R基因在肾肿瘤患者髓质中主要表达定位在远端小管,而在结石患者的肾髓质中主要表达定位于近端小管。P38-MAPK、Erk1/2、ATF2等基因在肾结石患者及肿瘤患者的髓质中均表达,且表达无明显差异性。CASR、VDR、PTH1R为我们进一步构建动物模型及干扰实验筛选待检基因及蛋白。