金骨莲胶囊对绝经后大鼠骨质疏松模型治疗效果的实验研究

作     者：杨启帆 

作者单位：遵义医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：刘毅

授予年度：2022年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：金骨莲胶囊 骨质疏松 白细胞介素1β 白细胞介素6 肿瘤坏死因子α 

摘      要：目的:本实验通过观察金骨莲胶囊对去卵巢SD大鼠的骨密度、血清中雌二醇含量、碱性磷酸酶、酸性磷酸酶、相关炎症因子如白细胞介素1β、白细胞介素6和肿瘤坏死因子α等的影响,探讨金骨莲胶囊治疗大鼠骨质疏松的疗效及相关机制,为将来在临床上应用金骨莲胶囊治疗骨质疏松患者的可行性提供理论依据。方法:1.采用63只健康、雌性、12周的SD大鼠为实验对象,分为空白组（7只）、假手术组（14只）、造模组（7只）、实验对照组（7只）、西药组（阿仑膦酸钠）（7只）、低剂量组（金骨莲）（7只）、中剂量组（金骨莲）（7只）、高剂量组（金骨莲）（7只）;造模组、实验对照组、西药组、低剂量组、中剂量组、高剂量组去除双侧卵巢建立绝经后骨质疏松模型,假手术组开腹切除双侧卵巢周围部分脂肪,12周后,从造模组、空白组、假手术组各取7只大鼠,通过骨密度仪检测法、酶联免疫吸附法分别对其骨密度、血清中雌二醇含量进行指标测定,通过苏木精-伊红染色法对各组大鼠胫骨标本进行骨形态学观察。2.验证骨质疏松模型建立成功后,西药组灌胃阿仑膦酸钠药物,低剂量组、中剂量组、高剂量组分别灌胃对应低、中、高剂量金骨莲胶囊药物12周;实验对照组予以等量蒸馏水灌胃相同时间。12周后检测各组骨密度、血清中雌二醇含量、碱性磷酸酶、酸性磷酸酶、白细胞介素1β、白细胞介素6和肿瘤坏死因子α含量。通过苏木精-伊红染色法对各组大鼠胫骨标本进行骨形态学观察。通过Micro-CT对各组胫骨进行扫描,观察骨结构。3.数据统计分析,应用SPSS26.0及Graph Pad Prism 8.0软件分析。各计量资料经正态性及方差齐性检验,符合正态分布的以均数±标准差（（?）±s）表示,组间比较采用方差分析,组间两两比较用bonferron法,P0.05为差异有显著性意义。结果:1.成功建立骨质疏松模型:通过切除雌性大鼠双侧卵巢使造模组大鼠的雌二醇（ng/L）水平明显低于空白对照组和假手术组（P0.05）,同时造模组大鼠的骨密度明显低于空白对照组和假手术组（P0.05）。苏木精-伊红染色法对各组大鼠胫骨标本进行骨形态学观察显示:造模组与假手术组、空白组相比大鼠胫骨骨小梁稀疏,小梁间间距宽,结构紊乱,脂肪细胞增多。2.各组大鼠血清雌二醇、肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6的含量情况:假手术组大鼠血清雌二醇含量明显高于其他各组（P0.05）,实验对照组血清雌二醇含量与西药组相比无统计学差异（P0.05）;进行高、中、低剂量金骨莲胶囊药物灌胃的大鼠血清雌二醇含量高剂量组、中剂量组、低剂量组显著低于实验对照组（P0.05）。金骨药物灌胃各组大鼠雌二醇含量显著高于西药组（P0.05）。假手术组大鼠肿瘤坏死因子α含量明显低于实验对照组（P0.01）,实验对照组与西药组相比较无统计学差异（P0.05）,实验对照组明显高于高剂量组、中剂量组、低剂量组（P0.01）,高剂量组、中剂量组明显低于西药组（P0.01）,西药组与低剂量组相比无统计学差异（P0.05）,高剂量组与中剂量组相比无统计学差异（P0.05）,高剂量组、中剂量组明显低于低剂量组（P0.01）。假手术组大鼠白细胞介素1β（ng/L）含量明显低于实验对照组（P0.01）,实验对照组与西药组相比较无统计学差异（P0.05）,实验对照组明显高于高剂量组、中剂量组、低剂量组（P0.01）,高剂量组、中剂量组、低剂量明显低于西药组（P0.01）,高剂量组与中剂量组相比较无统计学差异（P0.05）,高剂量组、中剂量组明显低于低剂量组（P0.05）,中剂量组与低剂量组相比较无统计学差异（P0.05）。假手术组大鼠白细胞介素6（pg/ml）含量明显低于实验对照组（P0.01）,实验对照组与西药组相比较无统计学差异（P0.05）,实验对照组明显高于高剂量组、中剂量组、低剂量组（P0.01）,高剂量组、中剂量组、低剂量组明显低于西药组（P0.01）。高剂量组与中剂量组相比较无统计学差异（P0.05）。高剂量组、中剂量组明显低于低剂量组（P0.05）。3.碱性磷酸酶与酸性磷酸酶检测结果:假手术组碱性磷酸酶活力明显高于实验对照组（P0.05）。假手术组、高、中、低剂量组酸性磷酸酶活力明显低于实验对照组（P0.05）。4.骨密度检测结果:假手术组、西药组、高剂量组、中剂量组大鼠股骨密度明显高于实验对照组（P0.05）。假手术组、西药组、高剂量组、中剂量组、低剂量大鼠胫骨密度明显高于实验对照组（P0.05）。5.各组胫骨Micro-CT扫描结果:实验对照与假手术组、西药组、高剂量组、中剂量组、低剂量大鼠相比,胫骨骨小梁稀疏,小梁间距宽,结构松散。***染色法对各组大鼠胫骨标本进行骨形态学观察显示:实验对照与假手术组、西药组、高剂