17β-雌二醇通过抑制Drp1/NIX相关线粒体自噬来调控巨噬细胞极化改善低氧后肺血管重塑

作     者：孙佳伟 

作者单位：河北医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：袁雅冬

授予年度：2022年

学科分类：1002[医学-临床医学] 10[医学] 

主      题：肺动脉高压 肺血管重塑 17β-雌二醇 巨噬细胞 线粒体自噬 极化 

摘      要：目的:探讨17β-雌二醇是否通过抑制Drp1/NIX相关线粒体自噬调控巨噬细胞极化改善低氧后肺血管重塑方法:动物水平:选取清洁级6-8周雌性SD大鼠42只,随机分成7组:假手术+常氧组(A组)、假手术+低氧组(B组)、去势+常氧组(C组)、去势+低氧组(D组)、去势+常氧+E2组(E组)、去势+低氧+E2组(F组)、去势+低氧+Mdivi-1组(G组)。切除卵巢后缝合为去势组;而假手术组则剖腹探查卵巢,无处理直接缝合。E2干预组每日皮下注射E2 20ug/kg,其余组大鼠每日皮下注射生理盐水0.1ml;去势+低氧+Mdivi-1组每日腹腔注射Mdivi-1 2.4mg/kg,其余组大鼠每日予以相同容积的腹腔注射生理盐水(1ml,1‰DMSO)。低氧组大鼠在低氧环境下饲养,常氧组大鼠正常空气饲养8周,测定各组大鼠右心室肥厚指数(RVHI),观察肺小血管形态学变化并检测血管壁占血管总面积(WA%)和肺小动脉中膜厚度比(WT%)。比色法测量肺组织中乳酸含量。应用实时聚合酶链式反应(PCR)检测组织TOMM20、Drp1、NIX、INOS以及CD206 mRNA水平,免疫印迹法测定去势大鼠的肺组织TOMM20、Drp1、NIX蛋白含量。结果:1低氧后大鼠一般情况:低氧组较常氧组相比,随着低氧时间的延长,出现反应迟钝,大鼠变得虚弱、毛色暗无光泽、进食水量少,最终以静卧状态为主,无死亡标本,而低氧状态下E2及Mdivi-1干预组亦存在上述情况,但程度相较去势+低氧组略好。2各组样本的RVHI:与常氧组相比,低氧条件下的各组大鼠RVHI均增加(P0.05),表明低氧状态下肺组织乳酸水平升高,E2、Mdivi-1可降低乳酸水平。5各组肺组织TOMM20、Drp1、NIX、INOS及CD206 mRNA表达水平:与各常氧组相比,低氧组TOMM20 mRNA表达下降(P0.05),结果表明E2、Mdivi-1抑制低氧状态下肺组织中NIX、Drp1蛋白表达。结论:1.低氧后肺血管重塑的可以通过E2、Mdivi-1的干预而改善。2.低氧可能会增加NIX相关线粒体自噬水平进而增加糖酵解水平促进M1型巨噬细胞表型的分化,参与肺血管重塑。3.E2可能具有类似Mdivi-1的作用,可能通过抑制Drp1/NIX相关线粒体自噬调控巨噬细胞极化改善低氧后肺血管重塑。