miR-381-3p对多发性骨髓瘤骨髓间质干细胞成骨分化的作用及机制研究

作     者：邱玲 

作者单位：西南医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：李晓明

授予年度：2022年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：多发性骨髓瘤 骨髓间充质干细胞 miR-381-3p FGF7 MEK/ERK 

摘      要：目的:虽然miRNAs在间充质干细胞（MSCs）的成骨过程中发挥重要作用,但miR-381-3p对MBDMSCs成骨分化的影响尚不清楚,本研究进一步明确miR-381-3p对多发性骨髓瘤骨髓间质干细胞成骨分化的影响。方法:对骨髓瘤骨病患者和正常对照组的间充质干细胞进行分离、培养、鉴定并用地塞米松诱导分化并进行相关的验证。用miR-381-3p mimic、miR-381-3p-inhibitor和FGF7 si RNA转染MBDMSCs,调控miR-381-3p或FGF7的表达。通过生物信息学方法搜寻,并通过荧光素酶报告基因实验进行了验证,预测和证实了miR-381-3p和FGF7之间的直接结合。采用RTq PCR、茜素红S染色和westernblot方法检测miR-381-3p对MBDMSCs成骨分化的影响。结果:分离的骨髓间充质干细胞形态正常,CD44、CD90和CD105标记物阳性,CD34和CD45标记物阴性。诱导后钙沉积和ALP、OC和OPN的相对m RNA表达水平显著增强,Mi R-381-3p在MBDMSCs中的表达上调,抑制miR-381-3p可显著促进成骨分化,反之亦然。此外,miR-381-3p可以直接靶向FGF7,负调控FGF7的表达。此外,FGF7的干扰减弱了钙沉积的增加,并且减弱了由于mir-381-3p下调导致的ALP,OC和OPN的相对m RNA的表达升高。此外,共转染si-FGF7,显著降低了miR-381-3p-inhibitor诱导的FGFR2、p-MEK和p-ERK1/2的相对蛋白表达的增强。结论:miR-381-3p直接靶向FGF7,通过MEK/ERK信号通路调控MBDMSCs中的成骨分化。