运动经PVAT旁分泌H2S对肥胖高血压大鼠血管平滑肌细胞KCNQ通道的调节作用

作     者：梁文豪 

作者单位：广州体育学院 

学位级别：硕士

导师姓名：胡敏;廖静雯

授予年度：2022年

学科分类：0403[教育学-体育学] 040302[教育学-运动人体科学(可授教育学、理学、医学学位)] 04[教育学] 

主      题：肥胖高血压 运动 PVAT H2S KCNQ 

摘      要：目的:本研究旨在探讨运动对PVAT旁分泌硫化氢影响肥胖大鼠血管功能的可能机制,通过阐述肠系膜动脉PVAT中CSE合成内源性HS对KCNQ通道的影响,为运动调控肥胖高血压的可能机制提供新思路。方法:选取5周龄雄性SD大鼠随机分为低脂饮食组(N组)和高脂饮食组(H组),24周后将建模成功的大鼠随机分为运动阻断组(HEB)、运动盐水组(HE)、安静阻断组(HCB)和安静盐水组(HC)。其中运动组进行为期13周(60min,5天/周)中等强度(55-60%VO)有氧跑台运动;阻断剂组大鼠依照50mg/kg经腹腔无菌注射CSE阻断剂PAG,盐水组大鼠则注射等量生理盐水。每周注射3次,连续注射13周。干预结束取材后,分别采用生化法和酶联免疫吸附试验检测大鼠血液糖脂代谢指标和炎症因子水平,分光光度法检测大鼠血清和肠系膜动脉PVAT中HS的含量,离体微血管试验测定肠系膜动脉血管张力及药物敏感性,蛋白免疫印迹试验测定大鼠肠系膜动脉KCNQ通道的蛋白表达水平及肠系膜动脉PVAT中CSE蛋白表达水平。结果采用One-way ANOVA,组间比较采用LSD法(方差齐性)或Games-Howell检验(方差不齐性),实验前后测数据进行正态分布检验,若服从正态分布,采用配对样本T检验,反之采用非参数检验,以均数±标准误表示。结果:(1)运动干预前,H组大鼠体重、Lee’s指数以及收缩压水平均显著高于N组大鼠(P0.05);运动干预后,与HC组比,HE组Lee’s指数、收缩压和平均动脉压均显著降低(P0.05);与HCB组比,HEB组Lee’s指数显著降低(P0.05),收缩压和舒张压无显著差异。(2)脂代谢指标,与HC组比,HE组的HDL水平显著升高(P0.01),LDL水平显著降低(P0.01),HEB组LDL、TC水平均低于HCB组;糖代谢指标,HE组Insulin水平显著低于HC组(P0.05),其余各组间均无显著差异;炎症因子指标,HE组IL-6、hs-CRP、TNF-α水平均显著低于HC组(P0.05),HEB组IL-6、hs-CRP显著低于HCB组(P0.05)。(3)HE组大鼠血液中HS含量显著高于HC组(19.50±1.86,P0.05);与HC组比,HE组肠系膜动脉PVAT中HS的含量显著升高(1141.66±68.64,P0.05),HEB组显著低于HE组(1047.45±13.05,P0.05),HCB组与HEB组比无显著差异。(4)分别经Retigabine、XE-991和4-AP预孵育后,HE组最大张力显著低于HC组(P0.05),HEB组最大张力与HCB组比无显著差异;p EC值结果显示各组间均无显著差异。浓度梯度张力结果显示,各组转移浴液后的张力均低于无浴液转移的张力水平,但无显著差异。(5)与HC组比,HE组KCNQ1、KCNQ5蛋白表达显著升高(P0.05),HCB组KCNQ4蛋白表达显著降低(P0.05);与HE组比,HEB组KCNQ1、KCNQ4表达显著降低(P0.05);HE组CSE的蛋白表达显著高于HC组(P0.05);与HE组比,HEB组CSE的表达水平显著降低(P0.01)。结论:(1)长期腹腔注射CSE阻断剂抑制内源性HS合成,削弱了运动对血压的调控作用,表明PVAT旁分泌HS在运动干预肥胖高血压中发挥了重要作用。(2)运动经PVAT旁分泌HS调控肥胖高血压可能依赖于KCNQ通道的表达,其亚基KCNQ4可能发挥了关键作用。