内脏异位综合征致病机制及死亡危险因素分析

作     者：刘春洁 

作者单位：上海交通大学 

学位级别：硕士

导师姓名：徐让

授予年度：2017年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100202[医学-儿科学] 10[医学] 

主      题：内脏异位综合征 拷贝数变异 心脏 斑马鱼 心血管畸形 危险因素 

摘      要：背景内脏异位综合征是由于左右体轴不对称结构形成异常,引起的胸腹腔内脏器官位置和功能异常。因约90%患者合并有严重的先天性心脏畸形,故其生存率低、预后差。目前大多数患者的发病原因仍不清楚,当前研究集中于相关基因的突变筛查,而关于拷贝数变异和内脏异位的关系的研究很局限,尤其是在中国患者人群。目的探索内脏异位综合征的致病机制和引起患者死亡的危险因素。方法收集63例中国散发内脏异位综合征患者。通过Affymetrix Cyto Scan HD微阵列芯片、q PCR和全外显子测序技术检测拷贝数变异和基因突变。通过斑马鱼原位杂交的方法检测候选致病基因的表达模式。利用反义吗啉环寡聚核苷酸基因敲低技术和m RNA过表达方法研究候选基因对斑马鱼左右体轴发育的作用。收集内脏异位综合征患者的临床资料,分析其临床特征和死亡危险因素。结果1、Affymetrix Cyto Scan HD微阵列芯片结果显示63例中国散发患者中存在21个罕见拷贝数变异。2、对这些片段上基因进行功能筛查,发现了7个参与左右体轴发育相关通路调控的基因。3、原位杂交结果显示候选基因在斑马鱼胚胎发育早期阶段表达。4、斑马鱼中上调或下调候选基因—dnah10、rnf115、tctn2、pacrg、galnt11和numb,出现心管环化的异常。5、斑马鱼中上调或下调上述基因影响左右体轴发育标志性基因—pitx2或lefty2的表达模式。6、临床特征分析结果:右侧异构比左侧异构合并有较严重的心血管畸形。7、内脏异位综合征患者死亡危险因素分析结果显示:中重度房室瓣反流在生存组和死亡组的差异有统计学意义(P=0.0309,OR=11.666)。结论1、罕见拷贝数变异是引起中国散发内脏异位综合征发生的重要原因。本研究首次在中国内脏异位患者中发现新的罕见拷贝数变异。2、dnah10、rnf115、tctn2、pacrg、galnt11和numb通过影响pitx2或lefty2的表达模式进而调控心管的环化。3、dnah10和rnf115参与左右体轴发育的调控过程,是内脏异位综合征新的致病基因。4、中重度房室瓣反流是内脏异位综合征患者死亡的重要危险因素。