外源性甲状腺素对孕期酒精暴露新生大鼠小脑发育的影响

作     者：李娟 

作者单位：延边大学 

学位级别：硕士

导师姓名：金福

授予年度：2018年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100211[医学-妇产科学] 10[医学] 

主      题：胎儿酒精效果 外源性甲状腺素 大鼠小脑发育 脑源性神经营养因子 

摘      要：目的:探讨孕期母鼠饮酒对新生大鼠小脑发育的影响及不同剂量外源性甲状腺素对其改善作用。方法:选取SPF级SD雌性大鼠48只随机分为正常对照组（N组）、胎儿酒精暴露模型组（A组）、酒精暴露模型+低剂量给药组（A+2.5T组）、酒精暴露模型+高剂量给药组（A+7.5T组）,及对应的代理母鼠组。孕鼠自受孕第6天至分娩新生鼠当日,A组、A+2.5T组及A+7.5T组孕鼠每日给予喂养韩国烧酒20ml（酒精浓度22%,热量为147J）;N组孕鼠每日摄取与A组酒精热卡相当8%含糖牛奶;代理母鼠组每日摄取正常鼠食。各组母鼠分娩6小时后与其新生鼠分开并处死,由代理母养育。A组、N组的新生鼠在P1～P10,每天于颈部皮下注射0.2 ml生理盐水,AT2.5组及AT7.5组新生鼠在P1～P10时,每天分别于颈部皮下注射已溶于0.2 ml生理盐水的2.5μg/kg.d、7.5μg/kg.d的甲状腺素。检测各组新生鼠生后不同时期（P7,P14,P21,P28）体重及血液中甲状腺素含量。采用免疫组化法检测各组新生大鼠不同时期小脑皮质内BDNF阳性浦肯野细胞的表达,Western blotting方法测各组不同时期小脑中BDNF蛋白表达。结果:1.出生后不同时期A组新生大鼠体重均低于N组（p0.05）;AT2.5组新生大鼠体重在P28时与N组比较无显著差异;第P21和P28时与A组比较明显增加（p0.05）;AT7.5组新生大鼠出生后体重均显著低于N组（p0.05）,而在P7和P28与A组比较有显著差异（p0.05）。2.出生后不同时期A组新生大鼠血液中甲状腺素的含量均显著低于N组（p0.05）;AT2.5组在第P28时甲状腺素量与正常组比较无显著差异,在第P21及P28时与A组比较明显增加（p0.05）;AT7.5组新生大鼠甲状腺素的量显著高于A组（p0.05）,在第P7时显著高于N组（p0.05）,第P14和P21时明显低于N组（p0.05）,第P28与N组比较无明显差异。***7.5组新生大鼠小脑皮层中BDNF阳性浦肯野细胞分布及形态与正常组相似,可观察到长而明显突起的,单层排列的,成熟的BDNF的浦肯野细胞,但A组和AT2.5组新生大鼠始终未出现完全单层排列、成熟BDNF阳性的浦肯野细胞,第P28时A组新生大鼠中BDNF阳性浦肯野细胞数明显减少。4.酒精组和酒精+低剂量甲状腺组新生大鼠小脑中BDNF蛋白量在出生后除第28天以外各时间点与正常组和酒精+高剂量甲状腺组相比较均显著较少（p0.05）,酒精+高剂量甲状腺组子鼠小脑中BDNF蛋白量在生后各个时期与正常组比较无显著性差异（p0.05）。结论:出生早期外源性甲状腺素能改善胎儿酒精效果新生大鼠出生后低甲状腺素状态,改善胎儿时期酒精暴露所致小脑发育障碍,高剂量外源性甲状腺素改善胎儿酒精效果作用更为显著。