SPRY7及RNF135蛋白的结构生物学研究

作     者：杨金金 

作者单位：暨南大学 

学位级别：硕士

导师姓名：邝志和

授予年度：2020年

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 07[理学] 

主      题：SPRY结构域 SPRY7 CLLD6 RNF135 晶体结构 核磁共振 

摘      要：SPRY/B30.2结构域是真核生物中常见的蛋白折叠方式之一,存在于数百个人体蛋白之中。大多数SPRY结构域可能介导蛋白质和蛋白质之间的相互作用,但是目前相当多蛋白中SPRY结构域的相互作用靶蛋白仍然未知,与不同靶蛋白特异性结合的结构基础也未知。SPRY7蛋白由spryd7基因编码,又称慢性淋巴细胞白血病缺失区基因6（CLLD6）蛋白或C13of1,分子中含有一个SPRY结构域。与大部分含有SPRY结构域的蛋白不同,SPRY7分子中除SPRY结构域外不含其他结构域。SPRY7可能参与重要的生物学过程,但其三维结构及生物学功能仍不清楚。本论文重组表达纯化了人SPRY7蛋白不同截短体,通过液体核磁共振对SPRY7蛋白SPRY结构域的结构域边界以及结构特征进行分析,选取合适的截短体进行蛋白质结晶和X-射线晶体衍射,首次解析了分辨率为1.62（?）的SPRY7蛋白SPRY结构域在非结合状态的晶体结构,并与其他已报道的SPRY结构域结构进行比较,发现SPRY7蛋白在结构及表面电荷等方面的一些独特之处,研究结果为深入了解SPRY7的结构与功能提供了重要基础。RNF135（又称Riplet、RUEL）是一个包含SPRY结构域的E3泛素化连接酶。研究发现RNF135蛋白具有多种生物学功能,包括介导细胞内RNA病毒感受器RIG-I蛋白的寡泛素化从而促进宿主天然免疫反应,但是RNF135蛋白SPRY结构域的三维结构仍未被解析。本论文通过液体核磁共振对RNF135进行研究,发现其SPRY结构域的N端区域对整体结构无明显影响,结果有助于对该蛋白的进一步结构生物学研究。