低剂量低温大气等离子体通过激活PI3K/Akt/mTOR通路促进施旺细胞增殖

作     者：葛碧波 

作者单位：安徽医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：徐春归

授予年度：2021年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100204[医学-神经病学] 10[医学] 

主      题：低温大气等离子体 周围神经损伤 施旺细胞 活性氧 活性氮 

摘      要：目的:周围神经损伤的治疗是医学届的一大难题,也是我国社会经济发展的重大需求。目前,周围神经损伤修复的治疗与研究仍然主要停留在缝合技术层面,针对神经损伤患者的实际临床治疗效果往往并不令人满意。施旺细胞（Schwann cells,SCs）在日常工作中维持正常神经内环境稳定,并在周围神经损伤后启动相应程序,促进周围神经的再生,在周围神经损伤的修复中发挥着重要作用。低温大气等离子体（cold atmospheric plasma,CAP）是近些年来兴起的一种生物医学治疗手段。研究表明,低剂量CAP可以促进细胞增殖。本研究利用低剂量CAP处理施旺细胞,观察CAP对施旺细胞的影响并研究其相关机制。方法:在本研究中,我们采用介质阻挡放电（DBD）产生的等离子体处理体外培养的施旺细胞,处理时间分别为0s、7s、14s、21s、28s。我们使用活性氧和活性氮检测试剂盒检测细胞培养液中的活性氧和活性氮浓度。使用DCFH-DA探针和DAFFMDA探针检测等离子体处理后细胞内活性氧和活性氮水平。使用CCK-8检测等离子体处理后施旺细胞的增殖情况。使用流式细胞术检测等离子体处理不同时间后各组细胞的细胞周期分布情况。使用Western Blot检测PI3K/Akt/m TOR通路相关蛋白和细胞周期相关蛋白的表达。结果:胞内外活性氧和活性氮检测结果表明,无论是细胞内还是细胞外,其数量始终与等离子体的处理时间呈正相关。CCK-8检测结果表明,低剂量CAP可以促进施旺细胞的增殖,而高剂量CAP可以抑制施旺细胞的生长。细胞周期检测结果表明,适当的CAP处理可促进细胞周期由G0/G1期向S+G2/M期转化,从而促进施旺细胞的增殖。Western Blot结果显示,低剂量CAP可能通过ROS激活PI3K/Akt/m TOR通路和细胞周期相关通路来促进施旺细胞的增殖。结论:低剂量CAP能促进施旺细胞的增殖。低剂量CAP可能通过ROS激活PI3K/Akt/m TOR通路和细胞周期相关通路来促进施旺细胞的增殖。