干制水产品中四环素类药物残留和N-亚硝胺的检测方法研究

作     者：申美容 

作者单位：烟台大学 

学位级别：硕士

导师姓名：邬旭然

授予年度：2021年

学科分类：0832[工学-食品科学与工程（可授工学、农学学位）] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 070302[理学-分析化学] 0703[理学-化学] 083204[工学-水产品加工及贮藏工程] 

主      题：干制水产品 QuEChERS 多壁碳纳米管 四环素 N-亚硝胺 HPLC GC-MS 

摘      要：近年来,海洋食品的安全问题日益突出,成为制约渔业发展的主要瓶颈。在水产品养殖过程中各类药物和添加剂的不合理使用,滥用误用等情况,对人们的身体健康和生命安全造成威胁。建立简便快速,安全可靠的前处理方法,对水产品中的有毒有害物质进行检测至关重要。因此本研究以多壁碳纳米管(MWCNTs)为主要吸附剂净化材料,采用QuEChERS前处理方法与快速滤过型净化方法(m-PFC),结合高效液相色谱(HPLC)和气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术,对干制水产品中的3种四环素类抗生素残留和9种N-亚硝胺(NAMS)进行了检测分析,主要研究内容和结果如下:1、建立了一种以MWCNTs复合材料为吸附剂的m-PFC净化装置,采用QuEChERS方法结合HPLC对干制水产品中的3种四环素类抗生素残留进行检测。样品采用0.1 mol/L的NaEDTA-Mcllvaine和0.1%甲酸乙腈进行萃取,加入NaSO促进有机相与水相分离,经-20°C低温放置促进四环素类抗生素的萃取,C18、Mg SO和MWCNTs作为吸附剂进行净化。结果表明:四环素(TC)、金霉素(CTC)和土霉素(OTC)3种四环素类抗生素在相应的浓度范围内线性良好,相关系数大于0.9989,方法定量限(LOQ)在15～23μg/kg范围内,在50、100、200μg/kg三个不同浓度加标水平下,整体回收率良好,相对标准偏差(RSD)为1.6%～10.6%,可用于实际样品的检测。2、基于改良QuEChERS方法结合GC-MS,建立了干制水产品中9种NAMS的检测。对QuEChERS方法进行改进,优化了萃取条件与吸附条件,获得最佳的前处理方法,最终选取乙腈为萃取溶剂,PSA、Mg SO、C18和MWCNTs为吸附净化材料,经DB-WAX柱分离,多重反应监测(MRM)模式下检测。结果表明本方法可满足N-二甲基亚硝胺(NDMA)、N-甲基乙基亚硝胺(NMEA)、N-二乙基亚硝胺(NDEA)、N-二丙基亚硝胺(NDPA)、N-二丁基亚硝胺(NDBA)、N-亚硝基哌啶(NPIP)、N-亚硝基吡咯烷(NPYR)、N-亚硝基吗啉(NMOR)、N-二苯基亚硝胺(NDPHA)9种NAMS的检测,结果显示9种NAMS在6.675 min～17.062 min内得到了很好的分离,且峰型较对称,保留时间以及峰面积均具备较好的重现性。在10～1000μg/L范围内线性良好,相关系数为0.9918～0.9999,LOD和LOQ分别为0.11～0.96μg/kg和0.36～3.18μg/kg。该方法整体回收率水平良好,RSD在0.2%～19.1%范围内。此外还比较了不同基质之间的回收率差异,发现在不同基质中的回收率无明显差异,可应用于干制水产品中NAMS的检测。此外分析了近三年干制水产品中NDMA超标的主要因素,为干制水产品中NDMA的限量标准提供参考依据。