RAGE及其配体在乳腺癌患者血浆中的表达及SNP介导的关联研究

作     者：李美灵 

作者单位：天津医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：郑红

授予年度：2020年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：乳腺癌 RAGE及其配体 SNPs 危险因素 预后 

摘      要：目的乳腺癌是当今社会影响女性生命健康的最主要的恶性肿瘤之一。近年来,在全世界范围内乳腺癌的发病率及死亡率均呈现出逐渐上升的趋势。研究发现晚期糖基化终末产物受体（RAGE）及其配体晚期糖基化终末产物（AGE）、高迁移率族蛋白B1（HMGB1）对肿瘤细胞的生长、增殖、侵袭、迁移有着重要的作用,进而会影响肿瘤的发生发展。本研究通过病例对照研究分析AGE、RAGE、HMGB1在血浆中的浓度差异,以及在SNP不同基因型分组下AGE、RAGE、HMGB1的浓度差异,探讨其浓度变化对乳腺癌早期筛查或者临床辅助诊断的意义。通过在病例人群和对照人群中对SNP位点进行基因分型,确定各SNP位点基因型的分布差异,为乳腺癌的风险预测、高危人群筛查提供参考依据。通过生存分析探讨影响乳腺癌患者预后的危险因素,并探究SNP位点的基因型与临床特征之间的关联性,有助于实现治疗和随访的个体化,并为临床治疗决策提供重要的依据。方法本研究采用ELISA实验测得RAGE及其配体AGE、HMGB1在乳腺癌患者及健康对照血浆中的浓度,对位于编码RAGE及其配体AGE、HMGB1的基因上的14个SNP位点进行基因分型实验,获得SNP位点的基因型在病例与对照中的分布情况。通过非参数检验分析RAGE及其配体AGE、HMGB1在病例与对照人群中的浓度分布是否具有差异,以及各SNP位点不同基因型下RAGE及其配体AGE、HMGB1在病例与对照人群中的浓度分布是否具有差异。采用Logistic回归分析流行病学因素及SNP位点与乳腺癌易感的关系,应用单因素与多因素Cox比例风险模型分析和探讨乳腺癌易感相关的SNP位点和临床病理特征对乳腺癌患者总生存的影响。最后通过卡方检验分析SNP与临床特征之间的关联性。结果1、RAGE及其配体AGE、HMGB1在病例人群与对照人群血浆中的浓度分布不同,具有统计学意义（P0.05）。其中RAGE和AGE在病例人群中的浓度低于对照人群,HMGB1在病例人群中的浓度高于对照人群。2、通过对RAGE及其配体AGE、HMGB1之间的关系探索,我们发现RAGE与AGE的表达水平成正相关关系,而RAGE与HMGB1之间存在着负相关关系,AGE与HMGB1之间也存在着负相关的关系,说明AGE与HMGB1在与RAGE结合过程中可能存在着一定的竞争关系。3、经卡方检验得rs2071288的基因型在病例和对照中的分布具有差异（P0.05）。单因素logistic回归分析结果显示rs2071288位点与乳腺癌的易感性有关,与CC基因型相比,CT基因型会增加患乳腺癌的风险,OR及95%CI分别为1.27（1.06-1.53）。多因素logistic回归分析发现,只有rs10916846的基因型分布与乳腺癌的易感性有关,与CT基因型相比,TT基因型会降低患乳腺癌的风险,OR及95%CI为0.85（0.72-1.00）。4、按照每个SNP位点的基因型分组,非参数检验分析发现病例人群中,各SNP位点的不同基因型之间的RAGE浓度具有差异;但在对照人群中只有rs2070600的不同基因型之间RAGE浓度具有差异。在病例人群中只有rs10916846的不同基因型之间AGE的浓度具有差异;在对照人群中只有rs160841的不同基因型之间AGE的浓度具有差异。5、单因素生存分析发现rs1800624、rs1800625、rs184003这3个位点与乳腺癌的预后有关。rs1800624中,与AA基因型相比,AT和TT基因型会增加乳腺癌的死亡风险,HR及95%CI是1.20（1.02-1.42）;rs1800625中,与AA基因型相比,AG和GG基因型会降低乳腺癌的死亡风险,HR及95%CI是0.83（0.69-1.00）;rs184003中,与CC基因型相比,AC、AA基因型会增加乳腺癌的死亡风险,HR及95%CI是1.22（1.01-1.47）。多因素Cox比例风险模型得到rs11557488与乳腺癌的预后有关,与GG基因型相比,AA、AG基因型的预后更差,HR及95%CI为1.71（1.06-2.75）。6、rs160841与肿瘤大小之间有关联,与AA基因型相比,GG基因型的患者其肿瘤直径大于2cm的风险更大,OR及95%CI为1.64（1.11-2.42）。rs4704与淋巴结转移之间有关联,与AA基因型相比,AG、GG基因型的患者发生转移的风险更大,OR及95%CI为1.22（1.05-1.42）、1.19（1.02-1.39）。结论1、AGE、RAGE、HMGB1在病例和对照人群中浓度分布不同,并且在SNP的调控下,不同基因型的AGE、RAGE、HMGB1的浓度分布也有所不同,所以AGE、RAGE、HMGB1有望成为乳腺癌的分子标志物以及治疗的新靶点。2、Rs10916846与