苹果梨果皮花青苷合成相关基因的克隆与表达分析

作     者：孟义淳 

作者单位：延边大学 

学位级别：硕士

导师姓名：曲柏宏

授予年度：2020年

学科分类：09[农学] 0902[农学-园艺学] 090201[农学-果树学] 

主      题：苹果梨 花青苷 bHLH转录因子 MYB转录因子 克隆 表达 

摘      要：套袋处理可以使苹果梨果实着色呈现红色,进而改善果实外观品质。果实着色程度受花青苷含量的影响,然而花青苷的生物合成又受到MYB、bHLH和WD40转录因子的调控。相关研究表明,花青苷生物合成调控中,MYB转录因子与bHLH转录因子扮演着重要的作用。通过本实验室前期研究发现,MYB1 08、bHLH62、bHLH130、MYC2对于果实着色具有一定影响。本试验以‘延边苹果梨’为试验材料,克隆苹果梨果实中MYB与bHLH转录因子家族中的PbMYB108、PbbHLH62、PbbHLH130、PbMYC2基因,并测定套袋果实与自然生长下果实不同着色程度下,其上述基因的表达量变化及其花青苷含量变化,进而探究上述基因与花青苷生物合成之间的联系。主要结果如下:1、本试验成功克隆出PbMYB108、PbbHLH62、PbbHLH130、PbMYC2基因,并对其进行生物信息学分析。2、利用qRT-PCR方法对苹果梨套袋与自然生长条件下不同时期上述基因的表达量测定,发现PbMYB108、PbbHLH62的表达与花青苷积累相关性不大,PbbHLH130、PbMYC2与花青苷的积累呈显著正相关,推测其为花青苷合成过程中重要基因。3、套袋处理可以提高苹果梨的着色情况,解袋后曝光会显著提高花青苷的产生与积累,未套袋的苹果梨果实中花青苷的含量较低,且平稳。套袋果解袋后叶绿素的含量呈现波动态势,且始终低于未套袋果实。套袋果解袋后果实中类胡萝卜素含量逐渐提高,但始终低于未套袋果实。