乳源β-酪啡肽-7对老龄小鼠血脂代谢紊乱的影响及机制研究

作     者：杨丹 

作者单位：扬州大学 

学位级别：硕士

导师姓名：印虹

授予年度：2020年

学科分类：0832[工学-食品科学与工程（可授工学、农学学位）] 08[工学] 083201[工学-食品科学] 

主      题：β-酪啡肽-7 衰老 肝脏 脂代谢 氧化应激 

摘      要：目的乳源β-酪啡肽-7（β-casormorphin-7,β-CM-7）是一种酪蛋白酶解产生的小分子活性肽,具有多种生物效能。本研究旨在探讨β-CM-7对衰老引起的血脂代谢紊乱是否有调控作用,以及其可能的作用机制,为挖掘β-CM-7的生物效能提供科学依据,也为应用β-CM-7改善衰老引起的健康问题提供新的研究资料。方法选用12只二月龄、48只十一月龄雄性昆明小鼠,自然条件下喂养一周。依据体质量随机取40只老年小鼠分组,每组10只:老龄未干预组、低剂量组、中剂量组、高剂量组;随机取青年小鼠10只作为青年对照组。老龄未干预组和青年对照组小鼠每天一次灌胃0.5mL的生理盐水,各剂量组小鼠分别灌胃等体积不同浓度的β-CM-7溶液（0.2× 10-6rriol/L、110-6 mol/L、5×10-6 ITiol/L）,为期 4 周,每周称重一次。结束后摘眼球取血,断颈处死,采集肝脏、胰腺等样品待测。观察血脂水平、胰腺激素分泌量、肝脏组织病理学状态、肝脂含量、脂代谢相关酶活性、脂代谢基因相对表达量、抗氧化应激能力和炎症因子水平的变化。·结果（1）β-CM-7对老龄小鼠血脂的影响:β-CM-7对小鼠总体生长机能无明显作用。与青年小鼠相比,老龄未干预组小鼠血清TG显著降低（P0.01）,HDL-c显著升高（P0.05）;胰腺组织 INS 降低、GLN 升高（P0.05）。与老龄未干预组相比,低剂量组小鼠GLU（P0.05）、HDL-c（P0.05）、GLN（P0.01）水平显著降低,TG、INS的水平显著升高（P0.05）;中剂量组小鼠HDL-c显著降低（P0.01）,INS显著升高（P0.01）;高剂量组HDL-c水平也极其显著降低（P0.01）。（2）β-CM-7对老龄小鼠肝脏脂代谢的影响:H＆E染色显示老化引起肝索紊乱、胞核模糊、肝细胞体积增加、存在颗粒变性等,不同浓度β-CM-7可以不同程度上改善肝组织损伤。与青年小鼠相比,老龄未干预组小鼠ACC（P0.05）、HSL（P0.01）水平显著降低,LPL 活性显著升高（P0.05）,SREBP-1c（P0.05）、SCD1（P=0.05）基因显著下调,CPT1基因也呈下调趋势（P0.05）。与老龄未干预组相比,用不同剂量β-CM-7干预后,小鼠ACC水平（P0.05）、HL活性（P0.01）均升高,LPL活性均有所降低（P0.05）。低剂量β-CM-7显著降低小鼠FAS和HSL水平、上调CPT1基因、下调ATGL基因（P0.05）;中剂量组小鼠肝FAS（P0.05）、HSL（P=0.09）水平降低;高剂量组肝TG水平（P0.05）、SREBP-1c（P0.01）和SCD1（P0.05）基因相对表达量显著增加。此外观察到,HSL水平、SCD1基因表达与β-CM-7有一定程度的剂量依赖作用,CPT1的基因表达则与其呈一定的负相关。（3）β-CM-7对老龄小鼠肝脏氧化应激及细胞因子的影响:与青年小鼠相比,老龄未干预组小鼠的SOD、MAO、MDA水平均有所增加,GSH-Px、IL-2水平均有所降低,但差异都不显著（P0.05）。与老龄未干预组相比,低剂量组和高剂量组小鼠SOD和GSH-Px活性均显著增加（P0.05）,而MAO、MDA水平也有所增加;中剂量小鼠SOD活性降低、GSH-Px活性增加不显著（P0.05）,但MAO、MDA水平也有所降低（P0.05）。同时,肝脏IL-2水平对于低浓度β-CM-7的刺激极其敏感（P0.01）,各剂量组小鼠的SIgA水平均无明显变化趋势（P0.05）。结论。衰老会对肝脏的形态和机能造成一定的影响,引起氧化应激、脂质代谢紊乱,使老龄小鼠血脂代谢出现异常。β-CM-7可以缓解氧化应激,改善肝组织学损伤,对老龄小鼠的血脂代谢紊乱状况有一定调节作用。其作用机制可能是通过调控胰腺组织分泌激素含量,提高脂肪合成相关酶活性和基因的表达,增加抗氧化酶活性,减少脂质氧化分解,增加肝脏TG净出口,从而调控血脂代谢功能。此外,炎症因子与脂代谢紊乱有一定关系,β-CM-7可以促进IL-2表达。值得注意的是,不同剂量β-CM-7的作用差异较大,且在不同体系内作用也不统一,具体调控机制还不明确,其对肝脏炎症改善是否有副作用需进一步验证。