能量水平对阿勒泰羔羊脂肪代谢的影响

作     者：高良霜 

作者单位：甘肃农业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：吴建平

授予年度：2020年

学科分类：0905[农学-畜牧学] 09[农学] 

主      题：能量水平 阿勒泰羊 血脂指标 基因mRNA表达 脂肪代谢 iTRAQ蛋白组学 

摘      要：为满足人们对健康优质羊肉的需求,本试验旨在研究不同能量水平对阿勒泰羔羊血清脂质指标、脂肪沉积分布、脂肪细胞大小、脂肪代谢相关基因mRNA表达,进一步利用iTRAQ蛋白组学技术筛选与脂肪代谢相关的蛋白及其通路,为脂肪代谢的调控提供数据参考。选取月龄相近(3.5月龄)、体重接近(19.16±0.54)kg、臀型一致、健康状况良好的阿勒泰母羔30只,随机分为3组,每组10只羊,自由采食60 d后,分别按照50%(0.25 MJ/W×)(50%代谢能组)、100%(0.5 MJ/W×d)(100%代谢能组)和150%(0.75 MJ/W×d)(150%代谢能组)的维持代谢能饲喂30 d。结果表明:(1)能量水平对阿勒泰羊的血清脂质指标具有显著影响。在不同能量水平条件下,50%代谢能组的血清葡萄糖、游离脂肪酸、低密度脂蛋白含量显著降低(P0.05)。150%代谢能组的脂肪细胞的直径、周长、面积显著大于100%代谢能组和50%代谢能组(P0.05),脂肪细胞个数显著低于其他两组(P0.05)。(3)不同能量水平对阿勒泰羊各部位脂肪代谢相关基因PPARγ、ACC、LPL和LEPR mRNA表达具有显著影响。在尾部脂肪、皮下脂肪和大网膜脂肪中,50%代谢能组的PPARγ、ACC和LPL基因mRNA表达显著低于150%代谢能组(P0.05);50%代谢能组的LEPR基因mRNA表达在尾部脂肪、皮下脂肪和大网膜脂肪中显著高于150%代谢能组(P0.05)。PPARγ、ACC和LPL有部位特异性,各基因在背最长肌中的表达显著低于在脂肪组织中的表达(P0.05)。(4)通过iTRAQ蛋白组学分析筛选出1866个差异蛋白,其中,在GO注释结果中,205个蛋白与氧化还原过程有关,130个蛋白与代谢过程有关,在KEGG注释结果中,151个蛋白与脂肪代谢有关,104个蛋白与能量代谢有关。在差异蛋白分析中,50%代谢能组与150%代谢能组相比有380个差异蛋白。随后,通过GO和KEGG的富集分析,挑选出与脂肪代谢相关的部分差异蛋白进行互作分析,发现EHHADH、ACOX3和ACAA1参与了PPAR信号、脂肪酸代谢、过氧化物酶体三个通路,而SCP2参与PPAR信号和过氧化物酶体通路,ECI2参与脂肪酸代谢和过氧化物酶体通路。在脂肪酸代谢通路中,与其他蛋白互作较多的是HADHA、HADH、ACAA2、HADHB和ACADS蛋白,在过氧化物酶体通路中,HSD17β4、HACL1蛋白互作较多,在PPAR信号通路中,互作较多得是SCP2。本试验结果说明能量水平对阿勒泰羔羊的血清脂质指标、各部位脂肪沉积、脂肪代谢相关基因在转录水平和蛋白通路上具有显著影响,为研究能量水平调控脂肪沉积提供了数据支持,并为阿勒泰羔羊脂肪代谢相关基因的生物学功能研究和遗传进化研究提供分子依据。