延迟注射PRP提高自体脂肪移植体积保留率及相关机制研究

作     者：黎媛 

作者单位：华中科技大学 

学位级别：硕士

导师姓名：孙家明

授予年度：2019年

学科分类：1002[医学-临床医学] 10[医学] 

主      题：富血小板血浆 分次注射 血管生成 脂肪移植 炎症反应 

摘      要：【目的】传统PRP辅助脂肪移植策略是自体脂肪与PRP同步移植,但效果并不稳定[1]。研究表明,移植脂肪中的血管再生过程具有独特的空间性与时间性[2]。在空间性上,植入的脂肪组织可分为从外周到中心的存活区、再生区、坏死区,血管由外周的存活区逐渐长入内部坏死区;在时间性上,血管在移植后7天左右才开始逐步再生,第28天达到高峰[3]。因此分析传统的混合移植出现效果不稳定的原因包括:1、激活后的PRP所释放的细胞因子作用时间只有8天,PRP中所含有的促血管生成因子(VEGF)在血管再生发生前已被消耗;2、脂肪移植后的一周内,是组织移植炎症反应的急性期,局部释放的炎性因子影响了PRP的促血管再生作用;3、PRP与移植脂肪组织混合不均匀,使得PRP作用不均匀,未能达到PRP的最高利用率。因此在脂肪移植后的急性炎症反应期过后,在移植脂肪内再次注射PRP是否可以更好地发挥其促血管再生作用,进一步提高移植脂肪的体积保留率值得探讨。因此,本论文的目的包括:探讨脂肪移植中通过延迟分次注射PRP促进血管新生,提高脂肪体积保留率的可行性;并对其作用机理进行初步探讨。【方法】将24只裸鼠分为3组:空白组(0.35m L脂肪与0.15m L生理盐水混合),单步组(0.35m L脂肪与0.15m LPRP混合),两步组(0.35m L脂肪(day 0)+0.075m L PRP(day 7)+0.075m L PRP(day 14))。将脂肪组织移植在裸鼠背部两侧,于6周14周后取材分析移植脂肪质量、体积、计算体积保留率,评估其统计学差异;对14周后取材,同时进行组织学及免疫组织化学染色,分析脂肪组织的完整性、新生血管数目、脂肪细胞再生和巨噬细胞浸润情况。【结果】第6周结果显示:三组之间的质量(空白组:168±22.86mg,单步组:159±39.62mg,两步组:186±186±24.7mg)、体积(空白组:0.165±0.022ml,单步组:0.159±0.034ml,两步组:0.147±0.067ml)、体积保留率(空白组:47.14±6.2%,单步组:45.428±9.7%,两步组:42±19%)均没有统计学差异;第14周显示,两步组的质量最高(空白组:87.5±4.509mg,单步组:106±3.403mg,两步组:136±3.605mg)、两步组的体积最高(空白组:0.0855±0.0045ml,单步组:0.10475±0.0034ml,两步组:0.1336±0.004ml)、两步组的体积保留率最高(空白组:24.44±1.2%,单步组:29.928±0.972%,两步组:38.190±1.15%),且两步组的脂肪保留率显著高于单步组(单步组:29.928±0.972%,两步组:38.190±1.15%);HE染色结果显示两步组的脂肪组织完整性最高;CD31染色显示在两步组中位于脂肪移植物中心的新血管数目最多(空白:8.5±1.29;单步:11.75±1.7078;两步组:21±3.6055),周脂素染色显示两步组新生脂肪细胞(前体脂肪细胞)数量高于单步组(两步组:130/视野;单步组:10/视野);Mac2/CD206染色显示两步组巨噬细胞浸润程度较单步组轻,空白组的炎性浸润最重。【结论】1、延迟注射PRP通过促进移植脂肪中心区域血管新生,从而提高移脂肪的体积保留率;2、延迟注射PRP能促进修复性炎症反应,加速组织重塑,促进移植脂肪中心区域脂肪细胞再生。