Endocan、VEGF在胶质母细胞瘤中的表达

作     者：王仕勤 

作者单位：天津医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：黄楹

授予年度：2019年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：胶质母细胞瘤 IDH突变 免疫组织化学 Endocan VEGF MVD 

摘      要：背景胶质瘤是成人常见的脑恶性肿瘤,胶质母细胞瘤(GBM)是恶性程度最高的胶质瘤(WHO IV级)。最新中枢神经系统系统肿瘤分类(2016 WHO)引入了分子病理学,根据IDH突变和1p/19q共缺失等将胶质瘤重新分为不同亚型。其中,胶质母细胞瘤分为IDH突变及IDH野生两种亚型。胶质母细胞瘤的组织病理学特征为:浸润性生长、核异型性、高增殖指数、坏死灶、微血管增生和多形性血管结构。胶质母细胞瘤微血管增生和高度异常的血管结构与正常脑血管在形态、功能和分子上显著不同。胶质母细胞瘤的微血管密度(MVD)与肿瘤分级相关,是患者预后不良的独立标志。多种促血管生成因子在胶质母细胞瘤中表达并促进血管形成,最主要的是血管内皮生长因子(VEGF);近年来发现Endocan是肿瘤新生血管生成的标志物,有助于揭示肿瘤的侵袭性和复发。Endocan在胶质母细胞瘤中表达升高已有报道,但其与胶质母细胞瘤IDH突变及IDH野生亚型的关系目前国内外尚未见报道。胶质母细胞瘤治疗通常包括手术切除、放疗和化疗的个性化综合治疗;尽管经过全面治疗,但胶质母细胞瘤患者的中位生存期仍不理想。对胶质母细胞瘤的抗血管生成靶向治疗研究或许可以成为一种新的治疗方法。目的本研究运用免疫组织化学检测胶质母细胞瘤病理组织标本中的Endocan、VEGF及MVD的表达,并通过RT-PCR检测胶质母细胞瘤组织标本中Endocan mRNA的表达水平。分析胶质母细胞瘤组织中Endocan、VEGF、MVD表达水平,探讨胶质母细胞瘤各亚型(IDH突变型和IDH野生型)间表达的相关性,为胶质母细胞瘤的诊断和抗血管靶向治疗提供依据。方法收集74例胶质母细胞瘤病理标本(IDH突变型组32例、IDH野生型组42例),20例正常脑组织标本(对照);选取肿瘤组织中具有代表性的区域制成组织芯片,分别进行Endocan、VEGF、MVD三种抗体的免疫组织化学染色。同时收集30例新鲜胶质母细胞瘤标本(IDH突变型组和IDH野生型组各15例),采用RT-PCR检测Endocan mRNA的表达水平。运用统计学分析软件IBM SPSS Statistics 25(SPSS,Chicago,IL)进行数据处理;比较胶质母细胞瘤不同亚型(IDH突变情况)之间Endocan、VEGF、MVD、Ki-67的表达差异及相关性。结果1.免疫组织化学检测结果表明,正常脑组织中Endocan在胶质细胞和血管中均不表达;胶质母细胞瘤组织中Endocan蛋白表达于细胞质和血管。正常脑组织无VEGF蛋白表达,胶质母细胞瘤均有VEGF蛋白表达。Endocan、VEGF在IDH野生型组和IDH突变型组的表达存在差异(P0.05),IDH野生型组高于IDH突变型组。2.免疫组织化学方法检测结果表明,标染MVD的CD34表达定位于细胞膜。正常脑组织中CD34阳性微血管数量少,微血管均匀散在分布,管腔小但结构基本一致;在胶质母细胞瘤中微血管数量增多并且分布不均匀,管腔形态及大小差异大。MVD在IDH野生型组和IDH突变型组的表达存在差异(P0.05),IDH野生型组高于IDH突变型组。Ki-67表达定位于细胞核,胶质母细胞瘤IDH野生型及IDH突变型Ki-67的表达水平无明显差异。3.RT-PCR检测表明,在胶质母细胞瘤IDH野生型组中Endocan mRNA的表达高于IDH突变型组,差异具有统计学意义(P0.05)。4.相关性分析结果表明,Endocan、VEGF在胶质母细胞瘤中的表达与MVD呈显著正相关(r=0.54,r=0.65,P均小于0.01);Endocan、VEGF的表达与Ki-67呈显著正相关(r=0.48,r=0.54,P均小于0.01)。结论Endocan在胶质母细胞瘤中有明显表达;相对于IDH突变型胶质母细胞瘤,IDH野生型胶质母细胞瘤中Endocan、VEGF表达显著增强。Endocan可作为胶质母细胞瘤新生血管标志物,反映肿瘤恶性程度,甚至对患者预后进行预测。