鱼油或藻油对NAFLD小鼠胆汁代谢的调节作用及昼夜节律探究

作     者：刘杨 

作者单位：武汉轻工大学 

学位级别：硕士

导师姓名：刘志国

授予年度：2019年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

主      题：NAFLD ω-3PUFA 胆汁 代谢组学 胆酸代谢 昼夜节律 

摘      要：目的:通过胆汁代谢组学分析,研究富含ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3PUFA)的膳食鱼油或藻油对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)小鼠胆汁组成及胆汁昼夜代谢调节。方法:雄性C57BL/6小鼠饲养于12h光/暗循环环境,随机分成4组:正常膳食组(CON组),高脂高胆固醇组(HFD组),高脂高胆固醇添加鱼油组(FO组),高脂高胆固醇添加藻油组(AO组)每组20只。12周实验结束时每组按相隔12h的早、晚组取样和处理,即ZT0(Zeitgeber time 0,n=10)和ZT12(Zeitgeber time 12,n=10)。采用试剂盒方法检测小鼠血生化指标:TG、TC、LDL-c、HDL-c、ALT、AST等;肝组织切片进行HE染色分析。LC-MS方法对胆汁进行总代谢物测定分析;多元变量统计分析筛选组间差异代谢物;KEGG库及Metaboanalyst对差异代谢物通路进行分析;Western Blotting检测与胆酸代谢相关核心蛋白。结果:与CON组相比,HFD组小鼠血生化指标异常、肝组织切片HE染色显示肝脂肪变性及肝损伤,呈现出NAFLD;与HFD组相比,FO、AO组小鼠上述指标均有则显著改善(p0.05)。各组内胆汁昼夜差异较大,且ZT0胆汁含量明显高于ZT12(p0.05)。代谢组学分析显示各组组间同一时间段胆汁成分差异较大并且涉及到多种代谢通路(如初级胆酸生物合成,脂质代谢,氨基酸代谢等);昼夜胆汁分析显示:CON组昼夜胆汁差异代谢物有25个,HFD组有22个,FO组有43个,AO组有27个,四组共同的昼夜差异代谢物为同型丝氨酸;CON、FO共昼夜差异代谢物为同型丝氨酸、乙酰肉毒碱、十二烷酸,CON、AO共昼夜差异代谢物为同型丝氨酸、D-核糖-5-磷酸、亚油酸。结论:鱼油或者藻油饲喂NAFLD小鼠后可调节胆汁成分,与富含ω-3PUFA的鱼油影响胆酸代谢、氨基酸代谢及脂质代谢相关;ω-3PUFA可能还参与胆汁的昼夜节律代谢。