脂肽化合物的分离及其抑制胡麻枯萎病病原菌的研究

作     者：孙艳新 

作者单位：内蒙古大学 

学位级别：硕士

导师姓名：苑琳

授予年度：2019年

学科分类：09[农学] 0904[农学-植物保护] 090401[农学-植物病理学] 090402[农学-农业昆虫与害虫防治] 

主      题：脂肽 胡麻枯萎病 萎缩芽孢杆菌 菌丝形态 

摘      要：胡麻属于亚麻科亚麻属,是山西、河北、内蒙古、宁夏、甘肃高寒高旱地区重要的经济作物。尖孢镰刀菌胡麻专化型是胡麻枯萎病的致病菌,是使胡麻减产的重要原因之一,因此开发针对胡麻枯萎病致病菌--尖孢镰刀菌的生物防治剂是具有生物学意义的。实验室前期分离到一株萎缩芽孢杆菌SF1,抑菌试验分析表明其对尖孢镰刀菌胡麻专化型抑菌率可高达60%左右。SF1的全基因序列中发现,具有编码挥发性抑菌物质及非挥发性抑菌物质的相关基因,其中非挥发性抑菌物质中,脂肽是抑制真菌生长的主要活性物质之一,但目前关于脂肽对尖孢镰刀菌的抑制效果及作用机制的研究较少。本研究利用单因素实验与响应面实验相结合,优化出菌株SF1高产脂肽的发酵培养基,并对菌株发酵所产脂肽进行提取纯化,并用脂肽处理胡麻枯萎病病原菌,探索脂肽对病原菌菌丝生长、形态及细胞膜的影响。主要研究结论如下:(1)采用单因素实验和响应面优化实验,优化了菌株SF1发酵培养基及培养条件,脂肽的产量提高了24.57%。(2)采用酸沉醇提法提取菌株SF1发酵液中脂肽,反相制备液相色谱分离获得三个峰,质谱检测表明成功分离获得了荷质比(m/z)为1056.5、1070.5、1084.5及少量1042.5的伊枯草菌素。(3)脂肽可引起尖孢镰刀菌胡麻专化型菌株菌丝形态异常,细胞膜被损坏,菌丝顶端膨大,菌丝出现隔膜一样的环状尖端。