长链非编码RNA LINC01133在鼻咽癌中的表达及作用机制探究

作     者：张文君 

作者单位：南京医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：何侠

授予年度：2019年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：LINC01133 鼻咽癌 YBX1 EMT 

摘      要：背景与目的:据报道,长链非编码RNA(lncRNA)在包括鼻咽癌(NPC)在内的多种癌症中发挥着重要的调控作用。许多研究表明,lncRNA LINC01133的表达失调涉及多种癌症进程。本研究旨在探索LINC01133在鼻咽癌中的调控作用。方法:本实验采用定量实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测LINC01133在鼻咽癌组织及细胞中的表达。功能获得和缺失实验在体外水平探讨了LINC01133的生物学功能。同时,异位移植瘤生长和皮下淋巴结转移裸鼠模型在体内水平验证LINC01133的生物学作用。Western blot法检测相关蛋白的表达水平。细胞分离和FISH实验确定LINC01133的亚细胞定位。机制研究表明LINC01133可以与YBX1蛋白相结合,这一结果经过了RNA pull-down实验,RNA免疫共沉淀实验(RIP),qRT-PCR,Western blot法和挽救实验的验证。结果:LINC01133在鼻咽癌组织和细胞中的表达水平显著下降。LINC01133的表达可抑制鼻咽癌细胞的增殖、侵袭和迁移。重要的是,LINC01133主要定位于鼻咽癌细胞的胞核中。RNA pull-down和RIP实验结果表明,LINC01133可以与YBX1蛋白直接结合,而YBX1蛋白可以部分逆转LINC01133对鼻咽癌细胞的增殖、侵袭和迁移抑制作用。LINC01133与YBX1的结合作用并没有改变YBX1的蛋白表达水平。此外,我们还发现LINC01133可以通过YBX1发挥对上皮间质转化进程(EMT)的抑制作用。结论:LINC01133在鼻咽癌组织和细胞中的表达水平显著下降,提示LINC01133对鼻咽癌的发生发展可能起到抑制作用。LINC01133可以与YBX1蛋白直接结合,介导NPC细胞的EMT进程及恶性生物学行为,这为NPC的预后和治疗提供了新的分子标志物。