温肾固疏方调节组织蛋白酶K表达影响绝经后骨质疏松症的实验研究

作     者：朱媛媛 

作者单位：南京中医药大学 

学位级别：硕士

导师姓名：郭海英

授予年度：2019年

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

主      题：温肾固疏方 绝经后骨质疏松症 去卵巢大鼠 Ⅰ型胶原 组织蛋白酶K 

摘      要：目的:观察温肾固疏方对去卵巢大鼠破骨细胞Cath K表达及骨组织C0l I的影响,探讨温肾固疏方治疗绝经后骨质疏松症的作用机制。方法:通过切除大鼠双侧卵巢建立绝经后骨质疏松大鼠模型。造模后,将30只SD大鼠随机分为模型组、雌激素组、温肾固疏方高、中、低剂量组,每组6只。假手术组仅切除卵巢旁脂肪组织。温肾固疏方高剂量组:[21.21g生药/(kg·d)];中剂量组:[l0.605g生药/(kg·d)];低剂量组:[5.3025 g生药/(kg·d)]。雌激素组:戊酸雌二醇[10 μ g/(kg·d)]。模型组和假手术组均给予生理盐水0.5 ml/100g灌胃。各组均连续干预2个月。HE染色观察骨组织形态;ELISA法测定血清PICP、ICTP、CTX、NTX的含量;免疫组化法测定骨组织ColI、Cath K表达率的变化。结果:实验结果表明,模型组大鼠骨小梁稀疏、断裂,符合骨质形态学破坏表现。各干预组大鼠骨小梁结构有所恢复,对抗骨质破坏效果显著,且中药组疗效与剂量相关,高剂量组疗效优于中、低剂量组。与假手术组相比较,模型组血清ICTP、NTX、CTX明显升高(P0.01),而PICP含量虽降低,但无统计学意义。与模型组相比较,雌激素组血清ICTP、NTX、CTX明显降低(P0.01),PICP含量升高,但无统计学意义;温肾固疏方低剂量组血清ICTP、NTX含量降低(P0.01),CTX含量降低(P=0.05),PICP含量升高,但无统计学意义;中药温肾固疏方高、中剂量组血清ICTP、NTX、CTX显著降低(P0.01),PICP含量明显升高(P0.01)。假手术组相比,模型组大鼠骨组织中ColI表达降低(P0.01),Cath K蛋白表达明显增多(P0.01);与模型组相比,中药温肾固疏方组和雌激素组骨组织ColI蛋白表达升高(P0.01),Cath K蛋白表达显著减少(P0.01)。结论:1.温肾固疏方可以从形态学方面有效地改善PMOP模型大鼠的骨质疏松状态。2.温肾固疏方治疗PMOP可能是通过下调破骨细胞Cath K表达,抑制骨组织ColⅠ分解而实现的。