ACTH应激对苏淮断奶母猪卵泡发育、类固醇激素合成及促黄体素受体表达的影响

作     者：朱怀森 

作者单位：南京农业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：鲍恩东

授予年度：2017年

学科分类：0905[农学-畜牧学] 09[农学] 

主      题：ACTH 断奶母猪 类固醇激素 促黄体素受体 应激 

摘      要：应激是机体在应对应激源刺激时所呈现的一种全身性的非特异性应答反应。在猪的集约化生产中,应激因素不可避免且在一定程度上影响猪的繁殖性能。应激过程中,下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴(HPA)激活并引起糖皮质类激素(GC)含量升高,直接影响机体的繁殖性能。而在应激状态下,动物代谢水平及酶活性升高可导致机体内脂肪、蛋白质分解加强,物质储备减少。为探讨应激对断奶母猪繁殖性能的影响机制,本文利用ACTH注射所致的应激模型来研究应激对断奶母猪繁殖性能的影响及其程度。试验选取10头苏淮断奶母猪并随机分为对照组(n=5)与试验组(n=5),对所有受试苏淮断奶母猪进行颈静脉插管手术。自手术第3天开始,以间隔8h给受试母猪注射ACTH(每次1IU/kg),对照组受试苏淮断奶母猪注射相同剂量的生理盐水(每次1IU/kg),连续注射7天。利用RT-PCR、ELISA、免疫组织化学、TUNEL原位杂交等方法检测受试母猪卵泡液中类固醇激素及血浆中皮质醇激素的含量,卵泡壁中类固醇激素合成酶(胆固醇侧链裂解酶(CYP11A1)、17-羟化酶(CYP17A1)、芳香化酶(CYP19A1)、类固醇激素合成急性期调节蛋白(StAR)、3 β羟基类固醇脱氢酶(3 β-HSD)及促黄体素受体(LHR)的转录水平和蛋白表达、壁层颗粒细胞凋亡等。试验结果显示,人工注射ACTH后受试母猪发情延迟;ACTH处理组受试母猪卵巢重量明显低于对照组受试母猪卵巢重量;ACTH处理组受试母猪血浆中皮质醇的含量显著升高(P0.01),血清中谷草转氨酶(AS.T)、肌酸激酶(CK)的活性显著增强(P0.05),甘油三酯、总胆固醇、葡萄糖、总蛋白等含量显著升高(P0.05);卵泡液中雌二醇、雄烯二酮含量均显著下降(P0.05),CYP17A1、CYP19A1、LHR、3β-HSD的基因转录水平降低,其相对应的蛋白表达量也明显下降(P0.05)。研究结果表明,ACTH注射所致的应激模型中,受试母猪的皮质醇含量升高提高了机体内物质代谢速率,减少了物质储备,进而影响母猪的繁殖性能;皮质醇含量升高导致类固醇激素合成酶的基因、蛋白表达量出现下降,从而影响卵泡的发育状态及卵泡液中类固醇激素的合成,造成类固醇激素合成及LHR的表达降低进而影响断奶母猪的繁殖性能。