多药耐药相关蛋白1（MRP1）在梗阻性黄疸肝组织中表达及意义的初步研究

作     者：祝建勇 

作者单位：第三军医大学 

学位级别：硕士

导师姓名：别平

授予年度：2003年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

主      题：梗阻性黄疸 多药耐药相关蛋白1 生长激素 免疫荧光 

摘      要：梗阻性黄疸(Obstructive Jaundice，OJ)，是临床上肝外胆管各种原因的阻塞所引起的胆汁淤积症，常见于壶腹周围癌、胰头癌、肝门部胆管癌、胆总管结石等疾病。OJ时胆汁淤积常可导致复杂而严重的全身性病理生理改变，长期重度淤胆还可影响手术方式的选择，导致术后恢复慢以及严重并发症，因此深入研究重度OJ时病理生理改变的分子机制，对临床如何增强长期重度OJ患者的手术耐受性、提高手术安全性、促进术后的恢复具有重要意义。 近年来，肝脏胆红素转运子越来越受到人们的关注。多药耐药相关蛋白1 (Multidrug Resistance-associated Protein 1 , MRP1/Mrp1分别指人和大鼠)是位于多种极性细胞膜表面介导其底物依赖ATP自细胞内转运至细胞外的一种膜糖蛋白，属ATP结合盒式(ATP Binding Cassette，ABC)基因家族，含有1531个氨基酸，对结合性胆红素及其它胆汁成分的亲合转运能力很强。MRP1/Mrp1在正常情况下表达量极少，当各种原因所致胆汁淤积时，排泄胆红素的主要转运子MRP2表达有特征性的下调，与此同时，作为一种“诱生型胆红素转运子，Mrp1表达在内毒素诱导的肝内淤胆大鼠模型中明显升高，推测其与结合性胆红素的代偿排泄密切相关。我们已在临床上发现，部分重度OJ和淤胆性肝炎患者在用常规治疗无法使黄疸减轻时，试用重组人生长激素(recombinant human Growth Hormone, rhGH)治疗可以获得较满意的疗效，但其作用机制研究较少。 本研究从重度OJ患者以及胆道梗阻-胆道再通的肝外淤胆大鼠模型中观察肝组织中MRP1/Mrp1表达的变化及上调的可能机制，探讨MRP1/Mrp1在重度OJ病理生理改变中的意义，为临床治疗提供依据。 主要的结果和结论如下： 1. OJ患者肝组织中MRP1的表达明显强于对照组;2. 胆道再通-生长激素注射组大鼠7d病死率明显低于胆道再通组，说明rhGH在胆道再通术前的应用增强了OJ大鼠的手术耐受性，提高了手术安全性;3. 大鼠结扎胆总管术后ALT、AKP显著升高，ALB、PA逐渐下降，TBIL在术后7d达到峰值，此后水平有所回落，而尿中DBIL在梗阻期间一直上升;TNF-α在结扎胆总管术后上升，随梗阻时间的延长，与假手术组逐渐出现非常显著的差异(P 胆道再通术后上述指标逐步好转，至术后7d接近或已达到正常水平;给予rhGH的大鼠各项指标要明显优于未用rhGH者，随用药天数的增加，效果更趋明显，说明应用rhGH能明显改善OJ大鼠再通术前的肝功能，并能促进术后的恢复;4. 动物实验证实了Mrp1的表达随着梗阻时间的延长明显升高，同时血清TBIL水平下降，尿样DBIL水平上升，在梗阻解除后Mrp1仍处于较高水平，推测Mrp1在梗阻性黄疸时以及梗阻解除早期都起到了代偿排泄胆红素的作用，是机体的一种自身调节机制;5. 梗阻期间Mrp1的表达与TNF-α水平密切相关，说明TNF-α可能通过上调Mrp1来减轻淤胆;rhGH可能通过限制TNF-α的过度释放间接上调Mrp1，发挥TNF-α两面性作用中积极的一面;rhGH亦可直接上调Mrp1，其信号途径尚需深入研究。