七味白术散对HRV感染乳鼠小肠iEL CD3+T细胞核中抗病毒蛋白表达的影响及清除肠道HRV作用

作     者：左胜男 

作者单位：湖南中医药大学 

学位级别：硕士

导师姓名：伍参荣

授予年度：2011年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：七味白术散 HRV p-JAK1 p-STAT1 PKR p-eIF 2α OAS RNaseL 

摘      要：目的：探讨七味白术散对HRV感染乳鼠小肠iEL CD3++T细胞胞核中抗病毒蛋白表达的影响,进一步阐明该方抗HRV机理。 方法：1.用HRV悬液,经口感染5日龄乳鼠,取乳鼠粪便经酶联免疫法(ELISA)证实轮状病毒抗原阳性后,建立乳鼠感染HRV腹泻模型。2.将感染HRV腹泻乳鼠随机分为模型组(MG)、七味白术散组(BG)、病毒唑组(ZG)、抑制剂组(YG)、七味白术散加抑制剂组(BYG),病毒唑加抑制剂组(ZYG),并设立正常对照组(NG),合共七组。各治疗组乳鼠分别经口滴入相应的药物50μl/(只·次)。正常对照组与模型组经口滴入等量细胞维持液。3.(1)分别于用药后15min、1h、2h、6h、12h、24h、32h、48h取乳鼠小肠粘膜,分离出CD3+T细胞,采用western blotting方法测定细胞质中p-JAK1、p-STAT1的表达;(2)分别于用药后32h,40h,48h取乳鼠小肠粘膜,分离出CD3+T细胞,采用western blotting方法测定细胞核中PKRp-eIF 2α、OAS,RNaseL蛋白的表达;(3)药物治疗5天后取乳鼠粪便,梯度稀释后接种于MA104细胞培养,采用免疫荧光的方法观察细胞中阳性病毒颗粒,判断药物对肠道病毒的清除作用。 结果： ***乳鼠小肠粘膜iEL中CD3+T细胞质p-JAKl蛋白的表达增加,6h至12h到达高峰,611后表达量均高于同时间点MG、ZG、BYG、ZYG、YG(P0.05)说明七味白术散对肠道HRV有良好的清除作用;同时BG HRV感染阳性病毒颗粒数明显低于YG、BYG、ZYG,差别有统计学意义(P0.05)。 结论：七味白术散可能通过激活感染乳鼠小肠粘膜iELCD3+T细胞质中JAK1,STAT1蛋白,促进细胞核中抗病毒蛋白(OAS、PKR)的表达,从而实现对HRV的清除作用。