几种寡肽的固相合成及其与DNA的相互作用

作     者：王宏慧 

作者单位：河南工业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：刘捷;卢奎

授予年度：2010年

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100701[医学-药物化学] 10[医学] 

主      题：阳离子肽 抗氧化性肽 固相合成 DNA 相互作用 

摘      要：寡肽类化合物一般都具有较强的生物活性,多数可以作为药物或药物前体。研究药物、药物先导物和药物候选物与DNA之间的相互作用,探索它们之间的构效关系,对于认识药物作用机理以及设计新药具有重要的理论和实际应用价值。本论文主要包括以下内容: 1采用Fmoc固相合成法设计合成了两类寡肽:一类是富含赖氨酸序列的阳离子肽(Cys-（Lys）和Cys-（Lys）-Ala);另一类是抗氧化活性肽（Ala-His-His、Ala-His-Lys、β-Ala-His、Leu-Lys-Tyr）。其中Cys-（Lys）、Cys-（Lys）-Ala、Ala-His-His为新化合物, Ala-His-Lys、β-Ala-His、Leu-Lys-Tyr的固相法合成未见文献报道。 2利用反相高效液相色谱,以C18柱进行分离制备了阳离子肽Cys-（Lys）和Cys-（Lys）-Ala,纯度分别为96.08%和97.33%。 3利用IR、ESI-MS、H NMR、C NMR对六种寡肽进行了表征,其结构如下: 4通过紫外光谱、荧光光谱、粘度和凝胶电泳研究了六种寡肽与DNA的相互作用。（1）阳离子肽Cys-（Lys）和Cys-（Lys）-Ala与DNA之间存在较强的相互作用,其作用模式主要为部分嵌插作用。结合常数分别为2.53×10～4 L·mol、3.15×10～4 L·mol。两种阳离子肽均能高效猝灭EB-DNA荧光体系,猝灭常数分别为2.83×10 L·mol、8.98×10～4 L·mol。推测其机理可能是肽表面的正电荷与DNA的磷酸基团之间的静电吸引,使阳离子和DNA的空间结构有可能发生变化,以利于嵌入到DNA碱基中。（2）四种抗氧化性肽Ala-His-Lys、Ala-His-Lys、β-Ala-His、Leu-Lys-Try与DNA也能发生一定程度的相互作用,推测Ala-His-Lys、Ala-His-Lys、β-Ala-His与DNA的作用模式可能是静电结合或沟槽作用;Leu-Lys-Try与DNA作用模式存在着部分嵌插作用,并伴随静电结合。四种抗氧化肽与DNA的相互作用强弱顺序为Leu-Lys-TyrAla-His-Lyβ-Ala-HisAla-His-His。 5.抗癌活性的筛选结果表明Cys-（Lys）和Cys-（Lys）-Ala均能有效的阻止致癌物对DNA的插入作用。这一结果为阳离子肽作为抗癌新药的筛选提供了理论支持。