Aurora A调控子宫内膜癌细胞功能的初步研究

作     者：王恺越 

作者单位：南京医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：周怀君

授予年度：2014年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：子宫内膜癌 Aurora A 增殖 侵袭 

摘      要：Aurora家族成员是一类高度保守,具调控细胞周期有序进展的重要丝/苏氨酸激酶。研究表明在包括子宫内膜癌和卵巢癌等妇科肿瘤等实体性肿瘤中Aurora A的表达,并与肿瘤的形成、发展和预后紧密相关,但目前Aurora家族成员在子宫内膜癌局部侵袭及远处转移中的调控机制不清。本研究发现子宫内膜癌中Aurora激酶家族成员AuroraAmRNA与蛋白的表达比正常子宫内膜中的表达显著增高,提示Aurora A可能在子宫内膜癌的发生发展过程中发挥重要作用。CCK-8(Cell Counting Kit-8)细胞增殖实验结果表明Ad-GFP-Aurora A腺病毒介导的外源性Aurora A的过表达以浓度依赖的方式明显促进子宫内膜癌细胞系Ishikawa和HEC-1B细胞的增殖(P0.05);利用靶向Aurora A的si-RNA有效干扰内源性Aurora A表达后,上述子宫内膜癌细胞的增殖能力则明显下降,分别降低了 28%和30%(P0.05)。Transwell侵袭实验结果表明,AuroraA显著促进Ishikawa、HEC-1B细胞的侵袭潜能,较对照组分别提高了 1.73倍与1.97倍(P0.05),而运用si-RNA技术下调内源性Aurora A表达以后,两类子宫内膜癌细胞的侵袭能力较对照组分别降低了 26%和 30%(P0.05);Western Blotting 和明胶酶谱(gletine zymography assay)实验发现过表达Aurora A促进HEC-1B细胞中基质金属蛋白酶 2(Matrix Metalloproteinase 2,MMP-2)和基质金属蛋白酶 9(Matrix Metalloproteinase 9,MMP-9)蛋白的表达及其酶活性;而仅上调Ishikawa细胞中基质金属蛋白酶2的表达及其酶活性,对基质金属蛋白酶9则无明显影响。研究发现,Aurora A磷酸化细胞中AKT第308位苏氨酸残基(T308)而非第473位丝氨酸残基(S473),影响MMP-2/MMP-9的表达及其活性;PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002能有效逆转子宫内膜癌细胞外源性Aurora A过表达对基质金属蛋白酶MMP-2和MMP-9的正性调控作用。综上所述,本研究证实丝/苏氨酸激酶AuroraA在子宫内膜癌中高表达,其作为癌基因促进子宫内膜癌细胞的增殖与侵袭潜能,提示Aurora A激酶可能作为子宫内膜癌的靶向治疗的新靶点。