石榴籽提取物对急性肝损伤的保护作用及其机制研究

作     者：付中喜 

作者单位：中南大学 

学位级别：硕士

导师姓名：林茜

授予年度：2010年

学科分类：1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 100403[医学-营养与食品卫生学] 10[医学] 

主      题：石榴籽提取物 抗氧化 CCl4 急性肝损伤 

摘      要：[目的]研究石榴籽提取物对急性肝损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制。 [方法]本研究通过体外化学实验,采用普鲁士兰法、邻二氮菲-Fe2+氧化法、邻苯三酚自氧化法对石榴籽提取物(多酚40%)的抗氧化能力评价,并与虎杖提取物(白藜芦醇50%),红车轴草提取物(异黄酮20%),咖啡豆提取物(绿原酸50%)及维生素C(99.99%)进行比较。动物实验中将40只小鼠随机分为5个组,正常对照组A、急性肝损伤模型组B以蒸馏水灌胃,不同剂量石榴籽提取物处理组C、D、E分别以200mg/kg.d、400mg/kg.d及600mg/kg.d石榴多酚灌胃,连续7天。B、C、D、E组均腹腔注射0.2%四氯化碳(CCl4)10ml/kg,正常对照组腹腔注射等量橄榄油,16小时后测定血清ALT、AST活性,肝组织中SOD活性及MDA含量。细胞实验中采用12.5、25、50、100及200μg/ml石榴籽提取物预处理L-02人胚肝细胞4小时后,再用10mmol/LCCl4处理1小时致肝细胞急性损伤,测定细胞存活率及细胞培养液中ALT、AST、LDH水平及细胞内SOD活力和MDA含量,分析与评价石榴籽提取物对肝细胞急性损伤的保护作用并初步探讨其机制。 [结果]体外实验显示：以所含主要抗氧化成分计,在同等浓度下,总抗氧化能力虎杖提取物石榴籽提取物维生素C咖啡豆提取物红车轴草提取物;清除羟基自由基能力虎杖提取物(EC50=0.126mg/mL)石榴籽提取物(EC50=0.138 mg/mL)维生素C(EC50=0.167 mg/mL)红车轴草提取物(EC50=0.282 mg/mL)咖啡豆提取物(EC50=0.552mg/mL);清除超氧阴离子能力虎杖提取物(EC50=0.020mg/mL)维生素C (EC50=0.023mg/mL)石榴籽提取物(EC50=0.027mg/mL)红车轴草提取物(EC50=0.040mg/mL)咖啡豆提取物(EC50=0.051 mg/mL)。 动物实验发现：小鼠腹腔注射0.2%CCl4 10ml/kg可致小鼠急性肝损伤,石榴多酚能显著抑制急性肝损伤小鼠血清ALT、AST浓度的升高,并可降低肝组织内MDA含量,提高肝组织内SOD活性。 细胞实验结果显示12.5μg/ml-200μg/ml的石榴籽提取物可保护CCl4诱导的人胚肝细胞损伤,降低氧化损伤细胞的ALT、AST、MDA及LDH含量(P0.05),升高SOD活性,提高细胞存活率(P0.05),并呈现显著的剂量-效应关系,以200μg/ml的浓度效果最为显著。 [结论]体外化学实验显示石榴籽提取物具有较好的抗氧化能力,优于咖啡豆提取物、红车轴草提取物;动物实验和细胞实验结果显示石榴籽提取物可预防性保护由CCl4所诱导的急性肝损伤,作用机制可能是通过其抗氧化活性来实现。石榴籽提取物在开发保健功能性食品方面具有广阔的应用前景。