胆汁内外引流术对梗阻性黄疸小鼠肠道FXR及TLR4表达的影响

作     者：申少华 

作者单位：中国人民解放军医学院 

学位级别：硕士

导师姓名：刘迎娣;李闻

授予年度：2016年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

主      题：梗阻性黄疸 胆汁引流 法尼酯衍生物X受体 Toll样受体4 

摘      要：研究背景：本研究属于梗阻性黄疸(Obstructive Jaundice, OJ,梗黄)系列研究。我们前期研究发现胆汁内引流术优于外引流术,机制与胆汁酸调节肝脏枯否细胞和肠道免疫系统功能有关。本研究假设：胆汁酸通过调节胆汁酸核受体(法尼酯衍生物X受体,Farnesoid X Receptor, FXR)和病原模式识别受体Toll样受体4(Toll-Like receptor 4, TLR4)在肠黏膜上皮细胞的表达,改善肠黏膜的屏障功能。研究目的：通过小鼠梗黄及胆汁内外引流模型,观察小鼠肠黏膜FXR与TLR4的表达变化并探讨两者之间的相互作用,阐明胆汁内引流术优于外引流术的分子机制。方法：采用成年雄性昆明小鼠60只随机分为四组,即梗黄组(OJ),胆汁外引流组(ED),胆汁内引流组(ID)和假手术组(SH),每组15只。建立小鼠模型：首次手术建立OJ组和SH组,手术后第9天部分OJ组小鼠行内外引流术,建立ID组和ED组。SH、OJ组在首次手术后第9天处死小鼠并采集标本,而ID、ED组在引流术后第9天取标本,心脏取血检测肝功能,取末端回肠组织行HE染色观察肠黏膜组织病理,利用Western blot和实时荧光定量PCR (Quantitative Real-time PCR, qPCR)法检测回肠黏膜FXR与TLR4蛋白及其mRNA的表达。此外,取40只小鼠随机均分为OJ, ED、ID和SH四组,各组中再用FXR激动剂GW4064(n=5)灌胃干预,羧甲基纤维素钠(CMC-Na, n=5)作为对照。结果：小鼠胆道梗阻后,肠黏膜FXR蛋白(0.792±0.034)及其mRNA(0.902±0.072)表达较SH组(分别为0.407±0.072和0.315±0.081)明显升高(OJ vs SH,均P0.05)。结论：小鼠梗黄形成后,肠道FXR升高,TLR1下降,胆汁内引流和外引流均可逆转这些改变,但内引流效果好于外引流。肠道内胆汁酸是引起这些变化的关键。