全脑缺血再灌注损伤后大鼠海马区Skp2的表达研究

作     者：张雪 

作者单位：华中科技大学 

学位级别：硕士

导师姓名：张传汉

授予年度：2011年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100204[医学-神经病学] 10[医学] 

主      题：S期激酶相关蛋白 细胞周期依赖性激酶抑制剂 脑缺血 神经胶质细胞 

摘      要：目的:观察大鼠全脑缺血再灌注损伤后海马区S期激酶相关蛋白2（S phase kinase-associated protein 2,Skp2）蛋白及其下游底物p27蛋白的表达变化,为进一步探讨其在缺血性脑损伤中的作用提供实验依据。 方法:雄性SD大鼠90只随机分为2组:对照组（n=30）,全脑缺血再灌注组（n=60）。采用Pulsinelli四血管结扎法建立大鼠全脑缺血再灌注损伤模型,全脑缺血30min后进行再灌注;对照组为假手术组,只分离血管,不进行缺血再灌注处理。分别于大鼠全脑缺血再灌注4d,7d用免疫组织化学法检测海马区星形胶质细胞和神经元变化;提取海马组织总RNA,采用实时荧光定量PCR检测海马区细胞周期蛋白cyclinB1 mRNA的表达变化;用western blot方法检测海马区Skp2及底物细胞周期依赖性激酶抑制剂p27蛋白的表达变化。 结果:与对照组相比,大鼠全脑缺血再灌注4d,7d后,星形胶质细胞明显活化、增殖;海马CA1区神经元在再灌注7d时明显减少。实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,在全脑缺血再灌注4d和7d海马区cyclinB1 mRNA表达明显增高（P0.05）。Western blot结果显示,与对照组相比,在全脑缺血再灌注4d和7d海马区Skp2表达逐渐增高,而p27蛋白的表达逐渐降低（P0.05）。 结论:全脑缺血再灌注损伤大鼠海马区Skp2的表达升高,其底物p27表达降低,可能与缺血后神经元凋亡及胶质细胞活化有关。