银杏外种皮中银杏酸的分离技术研究
作者单位：江苏大学
学位级别：硕士
导师姓名：陈钧
授予年度：2003年
学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学]
摘 要：银杏酸是银杏中除银杏内酯和银杏黄酮之外的另一类活性成分。银杏酸具有抑菌、消炎、抗过敏、抗肿瘤、杀虫作用，在药物化妆品及生物农药方面有较大的开发应用价值。银杏酸类可看作水杨酸分子在苯环C6位上连有较长侧链取代基的系列化合物，该长链分烷基链和烯基链，由13-17个碳原子组成。主要存在于银杏外种皮中，我国银杏资源丰富，银杏外种皮通常被作为废弃物，造成了资源的巨大浪费。本论文针对银杏外种皮中银杏酸的提取、分离、纯化及其定性定量分析展开研究，主要研究内容和结论如下： 1、首次对银杏外种皮的生药学特性进行了研究，对其显微特征、理化特征进行了鉴别，并测定了其水分和总灰分含量，分别为10.98±0.4％，3.55±0.5％。 2、本文建立了银杏酸的TLC、分光光度、HPLC等定性定量分析方法。采用60GF硅胶板，考察了不同展开剂对Rf的影响，认为以石油醚-乙醚-乙酸(70∶30∶1，v／v)，石油醚-乙醚-甲酸(70∶30∶1，v／v)为展开剂时，银杏酸的Rf值比较合适，分别为0.525和0.65。确定了分光光度法定量分析的检测波长为322nm，测定了标准曲线，表明分光光度法用于银杏酸的分析是可行的。HPLC分析条件：色谱柱：Inertsil ODS-2柱(250mm×4.6mm，5μm)，流动相：MeOH-3％HAC水溶液(92∶8，v／v)，流速：1.0mL·min，紫外检测波长：310nm，柱温：40℃。采用外标曲线法，对其分析的准确度进行了实验，认为HPLC法用于银杏酸的定量分析是可行的。 3、通过对银杏酸的吸附量的考察，从八种不同的树脂中选出了两种吸附量较大的树脂D290和S-8，吸附量分别为148.78mg／g、127.17mg／mL，对它们的静态吸附进行了研究，得到了其吸附等温线及吸附动力学曲线;对它们的等温线进行了拟合，结果为二者皆符合Langmuir模型;对它们的洗脱工艺进行了研究，S-8树脂以石油醚、石油醚-乙酸乙酯(90∶10，80∶20，v／v)溶液为洗脱剂再生，树脂连续使用三次吸附量无明显下降;D290树脂以石油醚-乙酸(99∶1，v／v)溶液为洗脱剂可以达到很高的解吸率;同时对S-8树脂的固定床吸附进行了研究，考察了固液接触时间和进口浓度对树脂吸附量的影响，认为料液入口浓度为13.54mg／mL、流速为5mL／min时较适宜;对S-8树脂的固定床洗脱工艺进行了研究，洗脱剂流速为1.8mL／min时较好，采用S-8树脂分离纯化银杏酸，银杏酸纯度可达到85.59％，回收率达92.35％;提出了用树脂吸附法分离纯化银杏酸的工艺流程建议，对银杏外种皮中银杏酸的不同纯化方法进行了比较，最后对S-8树脂吸附纯化银杏酸工艺的进行了综合评价 4、初步探讨了超临界CO萃取法分离银杏外种皮中银杏酸的工艺。进行了单因素实验，表明在萃取压力在20～30MPa时，银杏酸得率随压力的升高而升 江苏大学硕士学位论文 单因素实验，表明在萃取压力在200MPa时，银杏酸得率随压力的升高而升 高;萃取温度小于45℃时，银杏酸得率随温度的升高而升高，当温度超过45℃ 时，随温度的升高而降低;随着时间的增加，银杏酸收率逐渐增加，第二、三个 小时增加显著，到6h几乎萃取完全。进行了正交实验，方差分析表明压力和萃 取时间是影响银杏酸萃取银杏外种皮萃取得率的显著因素。萃取的最适条件为萃 取压力30MPa、萃取温度45℃、萃取时间6h。对银杏外种皮的石油醚浸膏进行 了超临界CO:萃取研究，银杏酸的回收率为91.16%，平均纯度为77.66%。对银 杏外种皮中银杏酸的不同提取方法进行了比较，最后对超临界CO:萃取银杏酸 的工艺进行了综合评价。
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