TRAMP-C2冻融抗原联合PEP-3多肽致敏树突状细胞诱导CTL对TRAMP-C2作用的研究

作     者：刘潇淇 

作者单位：重庆医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：易发平

授予年度：2015年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：树突状细胞 前列腺癌 细胞毒性T淋巴细胞 免疫治疗 

摘      要：目的：研究TRAMP-C2肿瘤冻融抗原联合PEP-3多肽致敏树突状细胞(DCs)体外诱导前列腺癌特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对前列腺癌细胞TRAMP-C2的杀伤效应。方法：联合应用rhGM-CSF和rhIL-4体外培养诱导骨髓来源单核细胞获得树突状细胞,负载TRAMP-C2肿瘤细胞冻融抗原和／或PEP-3多肽后发育为成熟树突状细胞,流式细胞术检测其细胞表型的变化。与同种异体脾T淋巴细胞共同孵育24h后刺激成为CTLs,将其与TRAMP-C2细胞共培养,通过流式细胞术、CCK8实验、软琼脂克隆实验、Transwell小室迁移实验以及划痕实验检测其对前列腺癌细胞TRAMP-C2的杀伤效应。ELISA法检测DCs和CTL上清液中IFN-y, TNF-p,以及IL-12含量。结果：与未致敏树突状细胞相比,致敏树突状细胞高表达与其成熟相关的MHC-Ⅱ分子、细胞粘附分子和共刺激分子(CD11c, CD40, CD80, CD86)。冻融抗原联合PEP-3多肽致敏DCs诱导的CTL对TRAMP-C2细胞凋亡、侵袭和迁移能力的影响明显高于其他组,细胞凋亡率明显增加,侵袭和迁移能力明显减弱。冻融抗原联合PEP-3致敏的DCs与T淋巴细胞共培养后,IFN-γ、TNF-β和IL-12的分泌量显著高于其它组。结论：TRAMP-C2肿瘤细胞冻融抗原联合PEP-3多肽致敏的树突状细胞体外诱导产生的CTL对TRAMP-C2细胞具有明显杀伤效应。