温热化疗对大肠癌细胞的作用及其对肿瘤细胞内HSP70表达的影响

作     者：王佳雷 

作者单位：广西医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：高枫

授予年度：2008年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：温热化疗 大肠癌 HSP70 RT-PCR MTT 

摘      要：目的观察温热化疗对大肠癌细胞株(CT26)的最佳作用时间及温度,探讨温热化疗对大肠癌细胞的作用及其细胞内HSP70mRNA表达的变化。 方法以BALB/C小鼠大肠癌细胞株CT26为研究对象,将对数生长期的CT26按6个时间点(即0.5h、1h、1.5h、2h、2.5h和3h)分成六组,将六组细胞分别给予化疗、热疗和温热化疗处理,加热温度分别设置为42℃,43℃,44℃和45℃,另设一阴性对照组。(1)利用二甲基噻咪二苯四唑溴盐比色法(MTT法)检测肿瘤细胞的活性;(2)运用RT-PCR方法分析肿瘤细胞内HSP70mRNA的表达情况。 结果从MTT水平上看,0.5h、1h、1.5h、2h、2.5h和3h肿瘤的平均抑制率分别为,58.64±17.67%、63.76±18.19%、72.09±19.75%、74.47±19.77%、73.41±20.47%和73.85±21.09%。1.5h的平均抑制率明显高于0.5h与1h的平均抑制率58.64±17.67%(p=0.001)、63.76±18.19%(p=0.007),与2h、2.5h和3h相比无统计学差异(p0.05)。42℃,43℃,44℃和45℃四个温度作用下的平均抑制率为,57.24±19.57%、58.07±19.95%、82.62±13.22%和83.65±11.12%。44℃作用条件下的平均抑制率明显高于42℃和43℃时的平均抑制率57.24±19.57%(p=0.000)、58.07±19.95%(p=0.001),但与45℃时相比较无统计学意义(p0.05)。当加热温度达44℃,加热时间达1.5小时,温热化疗作用下的抑制率高达93.35%,明显高于同条件下的热疗或化疗作用下的抑制率74.9±14.45%(p0.01)、59.3±0.95%(p0.01)。从mRNA水平上看:阴性对照组的HSP70 mRNA只有少量表达;化疗下HSP70 mRNA表达较阴性对照组明显增强;热疗下HSP70mRNA随着温度的升高而呈现高表达;温热化疗下HSP70的mRNA表达随着温度的升高逐渐下降,尤其当温度达到44℃、45℃时下降更为明显。 结论(1)温热化疗最佳作用时间为1.5h;(2)温热化疗最佳作用温度为44℃;(3)温热化疗较热疗或化疗更能够有效的抑制CT26肿瘤细胞的生长;(4)温热化疗能够显著的降低大肠癌细胞内HSP70mRNA的表达。