细胞色素P4502E1调控酒精与高脂协同所致脂肪肝炎的小鼠病理模型构建

作     者：盛芳 

作者单位：川北医学院 

学位级别：硕士

导师姓名：周仲辉;高晓凤

授予年度：2017年

学科分类：1002[医学-临床医学] 10[医学] 

主      题：细胞色素P4502E1 脂肪性肝炎 胃造瘘 病理模型 

摘      要：目的:(1)建立细胞色素P450E(CYP2E1)基因敲除鼠的肥胖和酒精协同增效性脂肪性肝炎动物模型。(2)探讨CYP2E1在酒精与高脂协同增效性脂肪性肝炎中的作用。方法:首先繁殖饲养CYP2E1基因敲除小鼠,并通过鼠尾基因鉴定筛选纯合子。然后分别将7周龄雄性CYP2E1基因敲除鼠和野生型小鼠同时分为4个处理组:1)正常饲料(对照)组:胃造瘘术后,通过微量注射泵每日以2μl/min的流速,580kcal/kg/d的液体常规饲料,恒速恒量灌注小鼠;2)酒精组:胃造瘘术后,通过微量注射泵每日以2ul/min的流速,580kcal/kg/d的液体常规饲料及15g/kg/d的酒精,恒速恒量灌注小鼠;3)高脂高胆固醇组:胃造瘘术后,通过微量注射泵每日以2μl/min的流速,780kcal/kg/d的液体高脂饲料(含0.21%的胆固醇)恒速恒量灌注小鼠;4)酒精协同高脂高胆固醇组:胃造瘘术后,通过微量注射泵每日以2μl/min的流速,780kcal/kg/d的液体高脂饲料(含0.21%的胆固醇)及15g/kg/d的酒精,恒速恒量灌注小鼠。同时饲喂2周后,取肝脏冰冻切片样本进行油红O、常规HE染色分析。结果:提取肝脏组织进行病理学分析,发现肝脏细胞出现气球样变,偶见点状坏死;油红O染色可见大量脂肪滴。同时通过Real-Time q PCR检测肝脏组织,发现酒精和高脂都能促进CYP2E1表达量增加,促进炎症因子表达,表明肥胖酒精协同增效性脂肪肝造模成功。结论:(1)成功构建小鼠高脂与酒精协同作用下的肝炎模型。(2)发现CYP2E1在高脂、酒精、及高脂酒精共同作用下都有介导炎症的作用。