咯利普兰在蛛网膜下腔出血早期脑损伤中的作用及其机制研究

作     者：彭禹聪 

作者单位：浙江大学 

学位级别：硕士

导师姓名：陈高

授予年度：2018年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100204[医学-神经病学] 10[医学] 

主      题：蛛网膜下腔出血 早期脑损伤 咯利普兰 炎症 SIRT1 NF-κB 

摘      要：目的咯利普兰(rolipram)是一种磷酸二醋酶 ⅣV(phosphodiesterase-4,PDE4)的特异性抑制剂。既往研究表明咯利普兰在脑创伤、阿尔兹海默病等中枢神经系统疾病中可发挥神经保护作用。但是咯利普兰在蛛网膜下腔出(subarachnoid hemorrhage,S AH)早期脑损伤中的作用仍不清楚。本研究旨在探索咯利普兰在S AH后早期脑损伤过程中的作用并进一步探究其相关机制。方法采用改良血管内穿刺法构建大鼠SAH模型,并将健康雄性SD大鼠随机分为以下4组:假手术组(sham组),假手术+咯利普兰组(sham+rolipram组),SAH+溶剂组(SAH+vehicle组),SAH+咯利普兰组(SAH+rolipram组)。手术后24小时统计比较各组大鼠的死亡率,蛛网膜下腔出血评分,脑组织含水量以及神经功能评分。通过蛋白质印记检测不同组别大鼠皮层脑组织内SIRT1、乙酰化NF-κB(ac-NF-KB)、TNF-α、IL-1β、IL-6以及IL-10的表达情况。通过免疫荧光染色评估各组大鼠皮层脑组织内小胶质细胞激活以及神经细胞死亡情况。结果蛛网膜下腔出血后24小时,SAH组大鼠脑组织内的含水量显著增加,同时伴有明显的神经功能缺失,相比于sham组存在统计学差异(P0.05)。此外,SAH组大鼠皮层内SIRT1、ac-NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-6以及IL-10的表达显著增多,小胶质细胞大量激活,同时神经细胞死亡明显增多(P0.05)。与SAH+vehicle组相比,咯利普兰治疗显著地减少了 SAH后大鼠脑组织内的含水量,改善了大鼠的神经功能,促进SIRT1以及保护性因子IL-10的表达,同时抑制NF-κB的激活及炎症因子IL-1β、IL-6以及TNF-α的释放。免疫荧光染色结果表明咯利普兰治疗显著抑制了皮层内小胶质细胞的活化,并能显著减少SAH后神经细胞的死亡(P0.05)。结论我们的研究表明咯利普兰能够减轻SAH后的早期脑损伤。咯利普兰在SAH后发挥神经保护作用可能与其调控SIRT1/NF-κB信号,进而抑制炎症反应并减少神经细胞死亡有关。咯利普兰在SAH的临床治疗中具有极佳的应用前景。