WWOX蛋白在散发性乳腺癌中的表达及抑癌作用机制初探

作     者：谷思洋 

作者单位：吉林大学 

学位级别：硕士

导师姓名：姜宏宇

授予年度：2012年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：散发性乳腺癌 WWOX VEGF Caspase-3 P53 

摘      要：前言： 乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，对其发病机制的研究涉及到许多抑癌基因，这其中就包括“包含氧化还原酶的ww结构域，即WWOX基因。WWOX基因作为近年发现的较新的抑癌基因在多种肿瘤中的研究已经广泛开展。VEGF、MMP-2、P53、Caspase-3及PCNA蛋白在乳腺癌发生发展过程中的作用已十分明确，是研究比较成熟的几个功能蛋白。为了探讨抑癌WWOX蛋白缺失在乳腺癌发生发展中的作用及WWOX蛋白发挥作用的可能机制，我们检测了乳腺纤维腺瘤和散发性乳腺癌组织中WWOX蛋白的表达情况，以及癌组织中VEGF、MMP-2、P53、Caspase-3及PCNA蛋白的表达情况，并对WWOX蛋白表达水平与乳腺癌病例临床病理相关参数及上述5种蛋白表达水平之间的关系进行了分析。 材料与方法： 1、组织标本 本研究共收集散发性乳腺癌手术切除病理标本190例，乳腺纤维腺瘤组织52例，患者年龄21～72岁，均为女性，所有患者术前均未进行化疗、放疗等抗癌治疗。所有标本均来自吉林大学附属第一医院肿瘤科病房2009年1月至2011年6月间经病理诊断明确的患者，并依据国际抗癌联盟1997年制定的TNM分期标准进行临床分期。 2、试剂 兔抗人WWOX多克隆抗体购自英国Abcam公司（ab33248），兔抗人VEGF （sc-80437）、 MMP-2（sc-71595）、 P53（sc-53394）、 Caspase-3（sc-56046）、PCNA（sc-53407）抗体购自美国Santa Cruz公司;正常山羊血清封闭液购自武汉博士德公司;DAB显色试剂盒，购自北京中杉金桥生物技术有限公司;S-P超敏浓缩（兔）试剂盒（KIT-0100R），购自福州迈新生物技术开发有限公司。 3、方法 应用免疫组织化学方法检测190例散发性乳腺癌和52例乳腺纤维腺瘤组织中WWOX蛋白的表达情况，同时检测了190例散发性乳腺癌中VEGF、MMP-2、P53、Caspase-3及PCNA蛋白的表达水平，并对WWOX蛋白表达水平与乳腺癌临床病理相关参数及后5种蛋白表达水平之间的关系进行了分析。对实验结果采用SPSS16.0统计软件包进行数据处理，各参数间相关性采用Pearson卡方检验，设定P0.05具有统计学意义。 结果： 乳腺癌组织中，WWOX蛋白阳性表达率为46.3%，乳腺纤维腺瘤组织中，WWOX蛋白阳性表达率为82.7%;与纤维腺瘤组织相比，乳腺癌组织中WWOX蛋白阳性表达率显著下降，差异具有统计学意义（P0.001）;VEGF、MMP-2、P53、Caspase-3及PCNA在乳腺癌组织中阳性表达率分别为70.0%、65.3%、61.1%、37.9%和85.3%;在年龄≤50岁、或者未绝经的患者群体里，WWOX蛋白阳性率显著高于年龄50岁、或者已绝经的患者群体（P0.001）;WWOX蛋白在发生淋巴结转移的病理组织中表达显著低于未转移组（P=0.014）;WWOX蛋白在VEGF阴性表达的病理组织中阳性率显著高于VEGF阳性的病理组织（P=0.016）;Caspase-3蛋白阳性表达的病理组织WWOX蛋白阳性率显著高于Caspase-3阴性组（P=0.046）;与其余参数相比较未见显著性差异。 结论： 1.与乳腺纤维腺瘤相比，散发性乳腺癌中WWOX蛋白表达显著降低;2.散发性乳腺癌中年龄较高、已绝经的患者群体WWOX蛋白表达缺失更为明显，WWOX蛋白表达缺失可能有助于肿瘤淋巴结转移;3. WWOX蛋白发挥抑癌作用可能是由于下调VEGF蛋白、上调Caspase-3蛋白而产生的。