中药复方真元颗粒质量标准及指纹图谱研究

作     者：张晓杭 

作者单位：天津大学 

学位级别：硕士

导师姓名：蒋建兰

授予年度：2014年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 07[理学] 070302[理学-分析化学] 0703[理学-化学] 10[医学] 

主      题：真元颗粒 TLC HPLC 中药指纹图谱 质量标准 

摘      要：真元颗粒处方来源于天津安仁中医医院二十余年的临床验方，本实验室采用微波干燥、干轧制粒等现代技术将其研发为颗粒剂。为控制产品质量，保证药效一致，本文以真元颗粒为研究对象，采用薄层色谱法(TLC)及高效液相色谱法(HPLC)对真元颗粒进行质量标准制订研究，包括药材的定性鉴别，毒性成分的限量检查及有效成分的含量测定等，建立真元颗粒质量标准草案，并采用HPLC-DAD法建立真元颗粒干浸膏指纹图谱，为真元颗粒的新药开发奠定基础。主要研究工作如下： 1.建立简单灵敏的当归、青蒿、防风、甘草薄层鉴别方法及乌头碱限量检查方法并进行方法学考察，薄层鉴别斑点清晰、分离度好、专属性强、阴性对照溶液无干扰，所建的方法适合真元颗粒中当归、青蒿、防风、甘草的定性鉴别和毒性成分乌头碱的限量检查。 2.建立有效成分甘草酸HPLC含量分析方法并进行方法学考察，试验结果如下：采用Agilent SB C18(4.6×250mm，5μm)色谱柱，以乙腈-0.5%磷酸水溶液(40：60)为流动相，等度洗脱，检测波长为250nm，流速为0.8mL/min，柱温为30℃;甘草酸质量浓度在4.40634.1μg/mL范围内，供试品浓度和甘草酸峰面积具有良好的线性关系，同时确定真元颗粒供试品溶液最佳进样浓度为0.02g/mL，阴性对照溶液无干扰，专属性良好;精密度、重现性和稳定性试验中，甘草酸峰面积RSD分别为0.86%、1.01%和1.89%，供试品溶液在24h内稳定;加样回收率试验中，甘草酸平均回收率为100.3%，RSD为2.16%(n=9)。试验结果表明该方法精密度高、专属性强、灵敏快速，结果准确可靠。 3.建立真元颗粒干浸膏HPLC-DAD指纹图谱分析方法并进行方法学考察，结果如下：采用Agilent SB C18(4.6×250mm，5μm)色谱柱，流动相为0.1%甲酸乙腈(A)-0.1%甲酸水(B);程序洗脱为0-5min，5%A-5%A;5-60min，5%A-15%A;60-80min，15%A-18%A;80-90min，18%A-22%A;90-140min，22%A-35%A;140-160min，35%A-37%A;160-170min，37%A-50%A;170-175min，50%A-5%A;175-180min，5%-5%A;流速1.0mL/min，检测波长254nm，柱温为30℃;分析10批次真元颗粒干浸膏检测结果，标定了具有代表性的26个色谱峰作为共有峰;进行方法学考察试验，26个共有峰的精密度、稳定性、重现性较好，RSD均小于3%;采用相关系数法和夹角余弦法进行相似度评价，相似度均在0.99以上，说明真元颗粒干浸膏质量均一稳定，可以科学有效控制真元颗粒产品的质量。