从肌电变化和相关免疫物质表达探讨肺与大肠的表里关系
作者单位：北京中医药大学
学位级别：硕士
导师姓名：郭霞珍
授予年度：2014年
学科分类：1005[医学-中医学] 100501[医学-中医基础理论] 10[医学]
摘 要：“肺与大肠相表里是中医藏象学说的重要内容之一,有着深厚的理论渊源。自《黄帝内经》肇始,经过历代医家不断的总结和升华,使理论逐渐发展完善。千百年来,这一理论一直有效地指导着中医学的理论发展和临床实践。随着免疫学、分子生物学和细胞生物学的发展,人们对“肺与大肠相表里的中医理论认识也日趋深入,不仅在临床应用中更加广泛,而且在实验研究上也取得了一定的成就。为了进一步认识这一经典理论的科学内涵,更有效地指导我们将其用之于临床诊疗之中,所以,本研究将从生物学发生机制的角度对“肺与大肠相表里的理论作进一步的探讨与研究。 1研究目的 本文首先从中医学文献研究的角度,分析探讨了“肺和大肠相表里这一经典理论形成的中医学基础,然后结合现代细胞生物学,电生理学等知识与研究技术及方法,通过观察肺与大肠的肌电变化、免疫相关机制及LPS信号通路的实验研究数据,对“肺与大肠相表里理论的生物学发生机制及其相互联系,进行了深入的分析与认识,为“肺与大肠相表里理论的基本内涵研究,中医藏象学说和中医基础理论的现代科学研究提供新的思路和方法。 2研究方法 2.1文献整理与研究 采用文献学、逻辑分析的方法,通过对秦汉时期、晋隋唐时期、宋金元时期和明清时期的经典医籍相关条文的分析,追溯“肺与大肠相表里理论的渊源和发展,并归纳总结了“肺与大肠相表里现代临床和实验研究进展和现状。 2.2实验研究 2.2.1肺与大肠组织肌电变化的实验研究 (1)实验动物及分组：随机将45只110-120g健康雌性SD大鼠分为限食组、限水组、高氧组、低氧组、正常组,每组9只。 (2)饲养条件：自然光照,温度24℃-26℃,湿度40%-60%。饮用自来水,饲料为普通大鼠颗粒饲料(北京维通利华实验动物技术有限公司)。 (3)实验方法：记录并分析这五组大鼠的膈肌、空肠肠肌、回肠肠肌、结肠肠肌的肌电中心频率和高低频比值变化。 2.2.2肺与大肠组织免疫相关性的实验研究 (1)实验动物及分组：本实验采用两批大鼠,每批35只,随机将每35只110-120g健康雌性SD大鼠分为5组,均为限食组、限水组、高氧组、低氧组、正常组,每组7只。 (2)饲养条件：自然光照,温度24℃-26℃,湿度40%-60%。饮用自来水,饲料为普通大鼠颗粒饲料(北京维通利华实验动物技术有限公司)。 (3)实验方法：分别取这五组大鼠的肝、脾、肺、肾、空肠、回肠、结肠组织为研究对象,用生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测PGE2,分析各模型组各个组织上PGE2的表达。 2.2.3肺与大肠LPS信号通路相关性的实验研究 (1)实验动物及分组：随机将45只110-120g健康雌性SD大鼠分为5组,高氧组、低氧组、限食组、限水组、正常组,每组9只。 (2)饲养条件：自然光照,温度24℃-26℃,湿度40%-60%。饮用自来水,饲料为普通大鼠颗粒饲料(北京维通利华实验动物技术有限公司)。 (3)实验方法：分别取这五组大鼠的肺、空肠、回肠、结肠组织为研究对象,用生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测CD14、TLR4、MD2,分析各模型组各个组织上这些物质的表达。 3研究结果 3.1各组大鼠肺组织、空肠组织、回肠组织、结肠组织的中心频率和高低频比值与正常组比较,均有统计学差异(P0.05)。高氧组和低氧组大鼠肺组织的中心频率和高低频比值降低时,大肠各肠段的中心频率和高低频比值也下降(P0.05);限食组和限水组大鼠大肠各肠段的中心频率和高低频比值下降时,肺组织的中心频率和高低频比值也降低(P0.05)。 3.2各组大鼠肺、空肠、回肠、结肠、脾、肝组织中的PGE2含量与正常组比较,均有增加(P0.05),并且在表达上具有相关性。其中肺和大肠各肠段组织在PGE2变化上更为相近(P0.05)。 3.3各组大鼠肺和空肠的TLR4含量与正常组比较,均有统计学差异(P0.05)。高氧组和低氧组大鼠肺组织中TLR4含量升高时,空肠组织中的TLR4含量也增加;限食组和限水组大鼠空肠组织中TLR4含量增加时,肺组织的TLR4含量也升高。 4研究结论 4.1大鼠在限食和限水刺激下,不仅肠肌中心频率和高低频比值下降,膈肌中心频率和高低频比值也有所降低;在高氧和低氧刺激下,大鼠的肠肌中心频率和高低频比值降低,而膈肌中心频率和高低频比值也有所下降。这提示我们,肺与大肠在生理机能方面具有相关性。 4.2肺、脾、肝、空肠、回肠、结肠在低氧、限食、限水刺激下,PGE2表达均有显著变化,而肺组织和大肠组织在高氧、低氧、限食、限水所有组别中PGE2含量变化都存在着一定的相关联系。这提示我们,肺和大肠之间是存在着免疫相关性的,肺与大肠具有共同的免疫物质基础,PGE2有可能是肺与大肠具有表里关系的免疫物质。而脾、肝组织在其中发生变化的原
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